第五章各类化学成分分析.ppt

第五章各类化学成分分析 讲授内容 第1节 生物碱类成分分析 第2节 黄酮类成分分析 第3节 三萜皂苷类成分分析 第4节 醌类成分分析 第5节 挥发性成分分析 第6节 木脂素类成分分析 第7节 其它类型成分分析 第一节 生物碱类成分分析 概述 理化性质 鉴别 含量测定 一、概述 生物碱是生物界除生物体必需的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族维生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。 含生物碱成分的常用中药：山豆根、制川乌、马钱子、延胡索、苦参、麻黄、黄连、黄柏、防己等 二、理化性质 物理性状 溶解性 紫外光谱特征 显色反应 物理性状 液体状的生物碱及个别小分子生物碱有挥发性甚至升华性 如：麻黄碱具有挥发性 咖啡因具有升华性 生物碱通常无色，但有长共轭结构，并有助色团的，可显不同颜色。如：小檗碱黄色 溶解性 大多数生物碱难溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有机溶剂 与酸结合成盐生水溶性增加，但酸不同，生成的盐水溶性有差异 季胺型生物碱、有氮氧配位键的生物碱易溶于水。 溶解性 液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂 含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液 沉淀反应 大多数生物碱在酸性水溶液可与某些试剂生成不溶于水的复盐或分子复合物。 酸性aq：KI-I2(棕红↓)；BiI3·KI (橘红～黄↓)；HgI2·2KI (类白↓)；硫氰酸铬铵(雷氏铵盐NH4[Cr(NH3)2(SCN)4](红↓) 中性：苦味酸(三硝基苯酚)(黄↓) 中药水浸液中蛋白质、多肽和鞣质等成分，也可与生物碱沉淀试剂生成沉淀，需排除干扰，防止出现假阳性结果。 显色反应 生物碱在一定pH条件下与一些酸性染料（多为磺酸肽类）生成有色配合物，可被氯仿等有机溶剂定量提出。 结构中具有酯键的酯碱，如：乌头碱可与异羟肟酸铁试剂反应产生紫红色 紫外光谱特征 结构中具有共轭体系的生物碱均有紫外吸收。 结构中的氮原子与发色团直接连接或参与发色团的生物碱，其吸收峰位置与测定时溶剂的pH值有关。 三、鉴别 沉淀法 薄层色谱法 气相色谱法 高效液相色谱法 1薄层色谱法 吸附剂：硅胶、氧化铝 展开剂：多用氯仿、苯等低极性溶剂，加入其它溶剂调整展开剂的极性。（由于硅胶显弱酸性，强碱性的生物碱在硅胶板上能形成盐，使Rf值很小或拖尾，形成复斑。在硅胶吸附薄层中，常用碱性系统或在碱性环境下展开。） 显色剂：改良碘化铋钾试剂，有时喷碘化铋钾试剂后再喷硝酸钠试剂，可使样品斑点更清晰；亦可用碘蒸气、硫酸铈、碘铂酸等。 例：三妙丸中黄柏及小檗碱的鉴别(苍术、黄柏、牛膝) 取三妙丸粉末0.1g,加乙醚10ml，超声处理15分钟，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，同制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液2ml、对照药材溶液与对照品溶液各1ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试剂(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。 2纸色谱法 可用于生物碱盐或游离碱的鉴别。 主要是以水为固定相的正相纸色谱法，分离效果常取决 于流动相的性质。BAW系统 显色剂：基本和薄层色谱法相同，但含硫酸的试剂不适用。 3高效液相色谱法 依据：tR 条件不同时，可已知品作内标，采用峰面积或峰高加大法 优点：快速，灵敏、微量等 四、含量测定 生物碱的含量测定方法早期常用酸碱滴定法、沉淀滴定法等经典的化学方法，近年来多采用分光光度法、薄层色谱法及高效液相色谱法等 （一）总生物碱的含量测定 （二）生物碱类单体成分的含量测定 （一）总生物碱的含量测定 酸碱滴定分析法 强碱滴定生物碱盐时，在70％～90％的乙醇介质中终点比在水中明显，因此常将生物碱盐溶于70 ％ ～ 90％乙醇，再用标准碱-乙醇液滴定。 若选择的溶剂及指示终点方法合适，也可用非水滴定法进行。 酸碱滴定分析法 例 止喘灵注射液中总生物碱的含量测定—酸碱滴定法 重量分析法 例 昆明山海棠片中总生物碱成分的含量测定—重量法 2分光光度法-直接测定法 不经过化学反应，利用生物碱物质自身的光吸收直接进行比色测定的方法。 一般用于药味较少，干扰不大的中药制剂中总生物碱的含量测定。 如：戊己丸 （2）比色法 生物碱本身具有的颜色 与氧化剂产生颜色 因所具有的功能基与试剂反应产生颜