鲤鱼脑乙酰胆碱脂酶的活性测定.docVIP

北京科技大学必修课程实验研究论文 题目:课程:班级:作者:学号:鲤鱼脑乙酰胆碱脂酶的活性测定 生物化学实验 黄凯辉化生学院生技1401 鲤鱼脑乙酰胆碱酯酶(AChE的活性测定 黄凯辉 [摘要] 建立了以新鲜猪心为材料,经过酸溶液提取,人造沸石吸附,硫酸铵溶液洗脱和三氯乙酸沉淀等步骤快速制备细胞色素C的方法,进而考察了制备蛋白质制品的一般原理和操作技术。测定细胞色素C 含量时,其520nm处吸光度的标准曲线为:y = 0.7762x + 0.05,R2 = 0.9974;将细胞色素C粗品溶液稀释适当倍数,加入少许联二亚硫酸钠后,在520nm下测其吸光度A=0.210。样品原液浓度 C=1.072 mg/mL;每500g心肌碎肉含细胞色素C=64.0 mg。 [关键词] 细胞色素C 分离纯化分光光度法 1 引言 乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,EC3.1.1.7存在于动物神经元和肌细胞之间的突上。其功能是催化神经递质乙酰胆碱的水解,从而终止神经冲动的传递。乙酰胆碱酯酶的性测定在临床上可以作为神 经系统疾病、肝脏系统疾病、重症肌无力、有机磷中毒等的重AChE可溶于水或稀盐溶液,因而可将生物组织及缓冲溶液置于组织匀浆器或组织捣碎机中制备组织匀浆,经离心后,其上清部分可用于测定组织中AChE的活性。 AChE的活性定方法主要有光学方法和电化