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GB/T 4789.28 1994 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂
1 主题内容与适用范围
本标准规定了各种染色法、培养基和试剂。
本标准适用于食品和食物中毒样品中各类微生物的检验。
2 染色液配制及染色法
2.1 美蓝染色法
2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液
美蓝 0.3g
95%乙醇 30mL
0.01%氢氧化钾溶液 100mL
将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。
2.1.2 染色法
将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。
2.1.3 结果
菌体呈蓝色。
2.2 革兰氏染色法
2.2.1 结晶紫染色液
结晶紫 1g
95%乙醇 20mL
1%草酸铵水溶液 80mL
将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
2.2.2 革兰氏 液
1g
化钾 2g
蒸馏水 300mL
将 与 化钾先进行混合,加入蒸馏水少许,充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至
300mL 。
2.2.3 沙黄复染液
沙黄 0.25g
95%乙醇 10mL
蒸馏水 90mL
将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
2.2.4 染色法
将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染 1min,水洗。
滴加革兰氏 液,作用 1min,水洗。
滴加95%乙醇脱色,约30s ;或将乙醇滴满整个涂片,立即倾去,再用乙醇滴
满整个涂片,脱色10s。
水洗,滴加复染液,复染 1min 。水洗,待干,镜检。
2.2.5 结果
革兰氏阳性菌呈紫色。革兰氏阴性菌呈红色。
注:亦可用 1:10 稀释石炭酸复红染色液作复染液,复染时间仅需10s。
2.3 耐酸性染色法(萎-倪二氏法)
2.3.1 石炭酸品红染色液
碱性品红 0.3g
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95%乙醇 10mL
5%酚水溶液 90mL
将品红溶解于乙醇中,然后与酚溶液混合。
2.3.2 3%盐酸-乙醇
浓盐酸 3mL
95%乙醇 97mL
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