可移动的遗传因子(转座子).pptVIP

质粒（plasmid） ? 存在于细菌等细胞质中? 双链环状DNA分子? 大约 1-200 Kb? 具有自主复制和转录能力? 不能独立存活? 在子细胞中保持恒定的拷贝数 并表达其遗传信息 常用质粒 pBR 322 4361 bp Tetr Ampr pUC 18/19 2686 bp Ampr LacZ pGEM-3Z 2743 bp Ampr LacZ pUC 118/119 3162 bp Ampr LacZ pBK-CMV pEGSH pSG5 pUC18/19 pWE15 普遍公认的是1964年提出的Holliday模型，该模型于1975年得到改进： ① 两个同源染色体DNA排列整齐 ② 一个DNA的一条链断裂、交叉，并与另一个 DNA对应的链连接，形成Holliday中间体。 ③ 通过分支移动产生异源双链DNA ④ Holliday交叉的上部或下部旋转1800，中间体 切开并修复，形成两个双链重组体DNA，分别为： 片段重组体和拼接重组体。 一、质粒的遗传学类型 1、F 质粒：为性质粒，是一个小的超螺旋闭环 DNA（约95kb）。 可将宿主染色体基因转移至另一宿主基因 组中，其本身转移到缺乏F 质粒的细胞。 2、R 质粒：为耐药性质粒，由抗性转移因子 DNA和决定抗性因子DNA两部分组成。 后者含有对抗生素的抗性基因，使宿主细 菌产生对抗生素的抗性。 3、col 质粒：含有合成大肠杆菌素基因的质粒， 能杀死不含大肠杆菌素的亲缘细菌。 4、质粒噬菌体（噬粒，phagemid）： 能把完整的质粒引入某种噬菌体DNA成为 一种嵌合体。 嵌合体DNA的遗传学行为取决于某一复制子 的强弱。 表现噬菌体行为——称质粒噬菌体； 表现质粒的行为——称噬菌体质粒。 二、质粒DNA的特性 （一）质粒的复制 ——依赖细菌染色体的多种酶系统。 质粒在细胞内的复制分两种类型： 1、严紧型质粒的复制： 只在细胞周期的一定阶段进行复制，与细菌 的繁殖密切相关。 需要蛋白质合成和 DNA polⅢ 的存在。 每个细胞只有 1～5个拷贝。 2、松弛型质粒的复制： 在整个细胞周期中随时都可进行复制。 需用DNA polⅠ的存在。 在细胞内有10～200个以上, 甚至多达数千个。 质粒复制方式： 均为半保留复制，并在复制周期内保持环状结构。 质粒复制形式多样，包括： 单向复制、双向复制、单向与双向并存。 （二）质粒的不相容性 质粒的不相容性是指细菌质粒不能在相同 细胞中同时存在的现象。 当某种质粒在宿主细胞内存在时，会阻止 其它质粒进入细胞寄宿，这种质粒称为 不相容质粒。 （三）质粒的转移性 通过细菌的结合作用，F 质粒在不丢失本 身的情况下，可从一个细胞转移到无F 质 粒的另一个细胞中。 图 质粒转移过程 p75 （四）质粒中的选择性标记 常用的选择性标记是抗生素抗性基因，包括： 1、氨苄青霉素抗性基因—— ampr 2、四环素抗性基因 ——tetr 3、氯霉素抗性基因——cmr 或 cat 常用的质粒载体含有一个或两个抗生素抗性基因。 三、特殊细菌质粒 （一）F 质粒 ——性质粒 F 质粒是一种环状的DNA分子，分子量94.5kb； F 质粒有整合进入细胞染色体而产生Hfr细胞 的能力； 染色体上有20多个整合位点，F质粒对其亲和力 不同，形成Hfr 细胞株的频率也是不同的； F 质粒的整合方向可以是顺时针，也可逆时针； F 质粒可从一个细胞转移到另一无F 质粒的细胞。 （二）R 质粒——耐药性质粒 R 质粒由抗性转移因子（RTF）和决定抗性 因子（r-决定子）两部分DNA片段组成。 R 质粒含有对抗生素的抗性基因，使宿主细 菌产生对抗生素的抗性，这种耐药性是可以 遗传的。 （三）Col 质粒——大肠杆菌质粒 是能产生大肠杆菌素的大肠杆菌质粒，可以 抑制或杀死不含Col 质粒的亲缘细菌。 四、真核生物中的质粒 已发现在单细胞真核生物酵母中有质粒的存在。 在高等生物细胞中，即使有质粒的存在，也 远不如在细菌中那样普遍。 在有性繁殖的高等生物细胞中，质粒DNA是 不能进行转移的。 ① 杀伤微粒是一个双链RNA分子，这是唯一 没