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不同稀释度的选择及报告方法 只若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中实例5) 实例 不同稀释液的平均菌落数 菌落总数 (CFU/mL) 报告方式 (CFU/mL) 10-1 10-2 10-3 5 多不可计 1650 513 513000 510 000 不同稀释度的选择及报告方法 只有若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中实例6) 实例 不同稀释液的平均菌落数 菌落总数 (CFU/mL) 报告方式 (CFU/mL) 10-1 10-2 10-3 6 27 11 5 270 270 不同稀释度的选择及报告方法 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中实例7) 实例 不同稀释液的平均菌落数 菌落总数 (CFU/mL) 报告方式 (CFU/mL) 10-1 10-2 10-3 7 多不可计 305 12 30500 31 000 不同稀释度的选择及报告方法 若所有稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出报告之 不要用“多不可计”报告 菌落计数的报告 菌落数在100以内时 按实有数字,以整数报告 菌落数大于100时 第3位数“四舍五入”,取前2位数字,后面用0代替 也可用10的指数来表示 见表中“报告方式”栏 实例 不同稀释液的平均菌落数 两个稀释度菌落数之比 菌落总数 (CFU/mL) 报告方式 (CFU/mL) 10-1 10-2 10-3 1 1365 164 20 --- 16 400 16 000 或1.6×104 2 2760 295 66 1.6 37750 38 000 或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100 27 000 或2.7×104 4 150 30 8 2 1500 1500 或1.5×103 5 多不可计 1650 513 --- 513000 510 000 或5.1×105 6 27 11 5 --- 270 270 7 多不可计 305 12 --- 30500 31 000 或3.1×104 注意事项 1.无菌操作。 2.进行稀释时,吸管口不得与下一个稀释液接触。 3.从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过15min。 4.稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,不可作为水样计数报告的依据。考虑水中含抑菌物质 5.应提前作好稀释用试管和各稀释度培养皿的标记。 6.若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。 习题作业 1.平皿计数法(GB/T5750.12-2006)测定的细菌数量是样品中的实际菌数吗?为什么? 2.某样品菌落总数测定时,所有稀释度平板上都无菌落生长,试分析出现此结果的原因有哪些。 习题作业 3.某种鸡厂对生产用水井的水样进行菌落总数测定时,按国家标准将水样处理及培养后,培养皿上生长的菌落数量记录如下: 稀释度 皿号 菌落数 10-1 10-2 10-3 1# 291 35 0 2# 279 37 3 习题作业 请回答下列问题: (1)对水样进行处理及培养条件是指什么? (2)本次实验选择的稀释度是多少?选择依据是什么? (3)列式计算并正确对测定结果进行报告。 (4)该指标(菌落总数)国家检验标准是什么(写出GB代号)?简要写出其检验程序。 * 项目九 综合实训---水中菌落总数的测定 水中菌落总数的测定 主讲教师 王福红 水中菌落总数的测定 检验依据:GB/T5750.12-2006 方法:平皿计数法 菌落总数(colony forming unit) 菌落总数(cfu) 水样经过处理,在一定条件下培养后,所得1mL水样中细菌菌落数量。 细菌总数 一定数量水样经过处理,在显微镜下对细菌进行直接计数。 实验目标 掌握生活饮用水菌落总数的测定方法 掌握水源水菌落总数的测定方法 判定水被细菌污染的程度和水的卫生质量 实验内容 1 培养基制备 2 水样稀释与接种 3 结果分析与报告 实验器材 水样 1、4号—自来水 2、5号—水源水(养殖场) 3、6号—桶装水 培养基 营养琼脂培养基 实验器材 设备、器材 无菌工作台、酒精灯、灭菌吸管、灭菌试管、稀释液、灭菌平皿、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、菌落计数器、天平、电炉等 检验程序 生活饮用水 水源水 倾注培养基 培养 接种平皿 稀释 菌落计数 实验操作 生活饮用水 用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样,
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