碘-淀粉比色法测定淀粉酶活力.pptVIP

情境七：蛋白质和酶 任务九：碘-淀粉比色法测定淀粉酶活力 知识点:碘-淀粉比色法测定淀粉酶活力 课程：化学及生物物料的识用 一、基本原理 淀粉遇碘产生蓝色，可以在一定量的淀粉中加入不同量的淀粉酶制剂，一定时间后，不出现蓝色且酶制剂用量最少的那个试液可以认为刚好将淀粉全部分解，可根据酶制剂的用量、淀粉的用量以及反应时间来计算该淀粉酶的活力。 二、操作步骤 （1）给比色管编号 1~10。 （2）在10只比色管中分别加入5mL淀粉试液，另取一只比色管，内盛蒸馏水，插入温度计。 （3）一起放入恒温水浴锅中保温(BF-7658 酶（细菌淀粉酶的一种） 60℃，胰酶40℃)。 （4）当温度恒定在所需温度后，按管号分别加入1.0~1.9mL(间隔为0.1mL)配制好的酶制剂溶液，计时保温60min。 二、操作步骤 （5）60min后，在每管中加入数滴c(?I2)=0.1mol·L-1碘溶液。记录不呈蓝色且加入酶制剂溶液最少的试管中加入酶制剂溶液的体积V(mL)。 （6）计算 酶活力=[mg ·(g·h)-1]= 式中：ml——称取淀粉的质量，g； m2——称取酶制剂的质量，g； V——不呈蓝色试管中淀粉酶用量最少所加酶制剂溶液的体积，mL。 三、注意事项 由于酶制剂的活力变化较大，如完全按上述操作，所加酶制剂溶夜体积可能不一定