SIALC研究蛋白质相互作用原理培训资料.pptVIP

SILAC研究蛋白质相互作用;SILAC研究蛋白质相互作用;1：SILAC定量蛋白质组学原理;1.1：SILAC定量蛋白质组学原理;1.2.1：培养基准备;1.2.2：细胞标记与测试;1.2.2：细胞标记与测试;1.2.3: 实验处理;1.2.3：蛋白质分离与质谱分析;1.2.4：结果形式;2: SILAC研究蛋白质相互作用;2.1：SILAC研究蛋白质相互作用原理;2.2：SILAC研究蛋白质相互作用特点;2.3 SILAC研究蛋白质相互作用方法分类;2.3.1 Pull down 法;2.3.2 Tag-CoIP法;2.3.3 常规CoIP法;原理： （1）将细胞用“重”型同位素氨基 酸标记，“轻”型细胞用目的目的蛋 白质的siRNA降低目的蛋白质的表达。 （2）等量混合“重”型和“轻”型 细胞的蛋白质，用目的蛋白质的抗体 进行CoIP。 （3）CoIP后的蛋白质进行LC-MS/MS 分析。;2.3.4：四种方法比较;THANKS!