缺氧及缺氧耐受性实验.ppt

实验目的 实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理 实验步骤 实验步骤 注 意 事 项 实 验 报 告 实 验 报 告 探 索 课 题 * 缺氧及缺氧耐受性实验 综合性实验 Page 197 机能学实验中心 2014年 （第九章 第一节） 1．了解乏氧性、血液性和组织性缺氧的动物缺氧模型的复制方法。 2．观察不同类型的缺氧对小鼠的呼吸功能、全身状态及肝脏、皮肤、口腔粘膜颜色的影响。 3．学习缺氧耐受性实验方法，观察环境温度对缺氧耐受性的影响。 实验要求 1. 以小组为单位完成本实验; 2. 并提出实验报告。 1．缺氧的的概念: 当机体得不到充足的氧气或不能充分利用氧气时，组织的代谢、功能，甚至形态结构都可能发生异常变化，这一病理过程称为缺氧。 缺氧分为四种：低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧 。 2．低张性缺氧（hypotonic hypoxia）： 以动脉血氧分压降低为基本特征的缺氧，又称乏氧性缺氧。 模型复制：小鼠缺氧瓶 钠石灰 3．血液性缺氧（hemic hypoxia）： 由于血红蛋白质或量改变，以致血液携带氧的能力降低而引起的缺氧。 一氧化碳中毒可引起血液性缺氧。 一氧化碳发生装置 模型复制： 4．组织性缺氧（histogenous hypoxia）： 在组织供氧正常的情况下，因细胞不能有效地利用氧而导致的缺氧。 因毒性物质抑制细胞生物氧化引起的缺氧又称为组织中毒性缺氧。 其典型例子是氰化物中毒。 实 验 原 理 5. 氰化物中毒解救药: 亚硝酸钠（NaNO2）和硫代硫酸钠（Na2S2O3） NaNO2是一种氧化剂，能使血红蛋白（Hb）氧化成高铁血红蛋白（HbFe3+OH），后者与氰酸根结合成氢化高铁血红蛋白，并使细胞色素氧化酶解脱出来，从而恢复细胞的生物氧化功能。 Na2S203与氰化细胞色素氧化酶及氰化高铁血红蛋白起反应，生成无毒的硫氢酸盐，从尿中排出体外，从而使细胞色素氧化酶及高铁血红蛋白从氰化物中解脱出来而被复活。 6. 影响机体对缺氧耐受性的因素： 机体对低氧的耐受性除受低氧程度和发生速度影响外，还与体力活动、中枢神经系统的功能代谢状态、环境温度、环境中CO2浓度等有关。 寒冷、体力活动、情绪激动等可增加机体耗氧量，可使缺氧耐受性降低； 体温降低、神经系统的抑制则因能降低机体耗氧率使缺氧耐受性升高，故低温麻醉可用于心脏外科手术，以延长手术所必需的阻断血流的时间。 CO 甲 乙 腹腔注射氰化钾0.1ml/10g 观察中毒表现，测定存活时间 当出现共济失调或竖尾时，立即抢救 三种缺氧动物尸体剖开腹腔，摘出肝脏置于小盘，比较其颜色 亚硝酸钠 硫代硫酸钠 用苦味酸标色区别 缺氧实验 测定存活时间 放入：水温40～420C水浴中 盛有冰水的容器中 甲鼠 乙鼠 缺氧耐受性实验 1．缺氧瓶要塞紧，必要时可涂以少量凡士林以防漏气。 2．吸取浓硫酸和甲酸时,注意不要溅到皮肤或衣服上，一氧化碳中毒性缺氧实验完毕后，及时处理一氧化碳发生器内的残物。 3．小鼠腹腔注射时勿伤肝脏，且避免注射入肠腔或膀胱内。 4．氰化物为剧毒物品，切勿沾染皮肤、粘膜，衣服以及环境，实验后将物品洗涤干净，处理好动物尸体。 5．注射器要标记专用。 竖尾 氰化钾中毒 CO中毒 乏氧性缺氧 突眼 痉挛 烦燥 肝脏 颜色 存活时间 （min） 呼吸 表1. 乏氧性、血液性和中毒性缺氧实验结果表 注：除时间和颜色项目以外其它可用“＋、－”号来表示。 表2. 环境温度对缺氧耐受性影响的实验结果表 0～4℃ 低温组（乙鼠） 40～42℃ 高温组（甲鼠） 室温 对照组 存活时间（min） 环境温度 分组 ▲ 先将实验结果分别填入于实验结果表1和表2后，逐条加以分析。 在抗疲劳生药的研究中，常应用这种缺氧、耐缺氧等实验 。 疲劳的定义：1982年在第五届国际运动生化学术会议上，将疲劳定义为：机体生理过程不能持续其特定水平上和/或不能维持预定的运动强度。 生药的抗疲劳作用的研究，常采用运动耐力（负重游泳和爬杆）、耐缺氧（常压或减压）、耐寒、耐高温等实验和血乳酸、血清尿素氮和肌/肝糖原等生化检测。 *