2016细胞生物学技术绪论.pptVIP

Pro- and antiangiogenic regulatory proteins are segregated into separate, distinct -granules in megakaryocyte proplatelets. Activation of specific protease activated receptors stimulates the selective release of -granules containing either endostatin or VEGF. Cell：最受欢迎的6篇癌症综述 Hallmarks of Cancer: The Next Generation Macrophages and Therapeutic Resistance in Cancer Cancer Epigenetics: From Mechanism to Therapy Cancer Invasion and the Microenvironment: Plasticity and Reciprocity Senescent Cells, Tumor Suppression, and Organismal Aging: Good Citizens, Bad Neighbors Genome-wide Chromatin State Transitions Associated with Developmental and Environmental Cues /publication/frame.php?i=252088p=pn=ver=flex The pharmacology of second-generation chimeric antigen receptors 2015, vol14, cancer immunotherapy /publication/frame.php?i=252088p=pn=ver=flex 思考题 解决以下问题需选择何种技术 定量检测几十万个分散的细胞的DNA含量 2. 看线粒体内外膜结构以及此处的某种蛋白颗粒 3. 定量检测一批光镜切片上含有某种蛋白质的细胞的数目 了解细胞发生死亡时的形态学和某个酶的改变 5. 了解某个新基因所编码的蛋白质的功能 思考： 为了尽可能彻底了解新蛋白的功能，需综合选择何种技术？ 细胞培养、基因转染、免疫印迹、免疫荧光、免疫电镜、免疫组化、原位杂交、流式细胞、免疫共沉淀、二维电泳、质谱、报告基因、 酵母双杂交…… * * * * * * 2.流式细胞术 flow cytometry (看不见形态图像) 高速度地自动分析单个细胞的多个生物学特 征或多种细胞生化成分的含量，一般在1-2分钟内 就能完成对细胞大群体的定量分析测定。 基于细胞化学技术！ 流式细胞仪 检测和分析细胞的化学组成还可以这么做 　 Northern Blot 检测基因在各种组织中的表达 mCAX Beta-actin 5.5kb 4.2kb “western blott” 四. 细胞结构成分的离心分离技术 - 操作并分析细胞和细胞器的技术 破碎细胞（匀浆） 分散细胞器和颗粒成分 离心分离 （差速分离、移动区带离心、等密度离心） 1974年诺贝尔生理医学奖 -De Duve 技术推动细胞生物学研究的光辉范例： The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1974 for their discoveries concerning the structural and functional organization of the cell Albert Claude Christian de Duve George E. Palade Cell fractionation chemical analysis Electron microscopy 差速离心法 （Differential centrifugation) 原理： 通过一系列递增速度的离心，依次将大小不同的颗粒逐级分离。 大小颗粒混合物 最大颗粒 较大颗粒 中等颗粒 小颗粒 上清 上清 上清 上清 1.细胞培养 2.细胞工程（细胞融合、基因修饰（转基因）、 干细胞技术等） 五.细胞培养和细胞工程技术 cell culture cell engineering －对细胞和大分子进行操作的技术 细胞生物学 与医学的关系 操作细胞 治疗疾病 左: 正常人脑产生多巴胺的细胞 数目较多 右: 巴金森氏症患者产生多巴胺