第八章微生物的遗传与变异2.pptVIP

第三节 基因重组 基因重组 凡把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新遗传型个体的方式。 基因重组的四种主要方式 转化 转导 杂交 原生质体融合 一、转化 受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换整合到自己的基因组中，从而获得部分新的遗传型状的现象. 接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子 供体菌DNA 转化子 单向性 供体菌游离DNA 供体菌DNA （转化因子） 转化示意图 几个概念：感受态、感受态因子、转化因子 感受态 受体细胞最容易接受外源DNA片断并实现转化的一种生理状态。 感受态因子 调节感受态的一类特异蛋白。 DNA结合蛋白，细胞壁自溶素，几种核酸酶 出现时期，维持长短，感受态水平 原因 细菌失去部分细胞壁的结果 细菌在细胞表面产生某种Ｅ引起 转化因子 游离的ＤＮＡ片断叫转化因子 转染 指用提纯的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主细胞或原生质体，可增值出一群正常病毒后代的现象。 转化因子由供体提供 自然情况下可由细菌细胞自行裂解产生，实验室里通过提取获得 双链ＤＮＡ(dSDNA)有转化能力，单链(ssDNA)没有，但是进入细胞后必须经酶解为ssDNA后才能与基因组整合 枯草芽孢杆菌的自然转化过程（革兰氏阳性菌的转化模型） 肺炎链球菌的转化过程 自然遗传转化的进行涉及到细菌染色体上几十个 基因的功能及彼此间的相互协调，因此被认为是 名副其实 的细菌水平基因转移途径。 目前的研究热点： 1）细菌为什么要耗费如此多的染色体遗传资源来进行自然转化， 即该过程的生物学意义到底何在？它对细菌自身有什么好处？ （人们已提出了一些假说，但均不圆满） 2）自然转化过程的很多细节仍不清楚，包括细菌如何协调感受态 的建立，外源DNA进入和重组的具体过程等等 3）细菌中具有自然转化能力的范围，到底有那些菌具有自然 转化能力？ 4）转化DNA的来源和在自然环境中发生的自然转化 三、接合 遗传物质分子水平 接合：通过细胞与细胞的直接接触而产生的 遗传信息的转移和重组过程 指把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新遗传型个体的方式 细菌、放线菌中常见 简单、复杂（膜限定） 细菌的“接合”状态 中间平板上长出的原养型菌落 是两菌株之间发生了遗传交换 和重组所致！ 中间平板上长出的原养型菌落 是两菌株之间发生了遗传交换 和重组所致！ 机制 (大肠杆菌的接合机制) 接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导 F因子的分子量通常为5×107，上面有编码细菌产生性菌毛 （sex pili）及控制接合过程进行的20多个基因。 含有F因子的细胞：“雄性”菌株（F+），其细胞表面有性菌毛 不含F因子的细胞：“雌性”菌株（F-），细胞表面没有性菌毛 F因子为附加体质粒 既可以脱离染色体在细胞内独立存在， 也可插入（整合）到染色体上。 F因子的四种细胞形式 a）F-菌株， 不含F因子，没有性菌毛，但可以通过 接合作用接收 F因子而变成雄性菌株（F+）； b）F+菌株， F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 c）Hfr菌株，F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。 d）F′菌株，Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时， 形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F′因 子。 细胞表面同样有性菌毛。 染色体 Hfr 质粒 F+菌 F质粒转移的不同结果 F ’质粒 基因定位和基因组测序---中断杂交（interrupted mating）技术 利用Hfr×F-的接合过程，在不同时间取样，并把样品猛烈搅拌以 分散接合中的细菌，然后分析受体细菌基因型，以时间(分钟)为 单位绘制遗传图谱，该图谱是细菌染色体上基因顺序的直接反映。 证实接合过程需要细胞间的直接接触的 “U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ） 二、转导 通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA小片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传形状的现象。 获得新遗传形状的受体细胞称为转导子 第一寄主菌 转导示意图 第二寄主菌 Why？ 四、原生质体融合 通过人为的方法，使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合，并进而发生遗传重组以产生同时带有双亲性状的、遗传性稳定的融合子的过程，称为原生质体融合 真核微生物的基因重组 真核微生物基因重组方式：有性杂交、准性生殖、原生质体融合、转化等 有性杂交：指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组，进而产生新遗传性状后代。 有性杂交方式