《酶通论》-精选课件(公开).pptVIP

Biochemistry 酶的概念 酶的本质基本上是蛋白质，但不能是所有的蛋白质都是酶，只有那些具有催化活性的蛋白质才是酶。细胞中大部分球蛋白为酶 酶是由生物活细胞产生的，具有高效催化功能和高度专一性的一类特殊蛋白质（核酶化学本质是RNA，不是蛋白质），又叫生物催化剂。 酶促反应：由酶催化的反应。 底物：被酶催化的物质称为底物（S）。 产物：反应生成的物质。 酶的活性：酶所具有的催化能力。 酶的失活：如果酶失去催化能力。 一、酶学研究史 19世纪中叶对发酵本质的探讨： 1857年 Pasteur认为发酵分几个阶段进行, 每一 步都有特定的酶参与, 但酶只在活体细胞中才能起 作用。发酵是酵母细胞活动的结果。 1897年 Büchner兄弟用酵母提取液实现发酵，证 明了酶可以离开细胞起作用。 酶的名称 1878年 Kühne提出enzyme一词：“在酵母中”。 1898年 Duclaux提出用后缀“ase”表示酶。 酶学研究史 1894年 Fisher提出酶与底物作用的“锁钥”学说 1913年 Michaelis 和 Menton米氏方程建立。 关于酶的化学本质的认识： 1833年 Payen 和 Persoz从麦芽的水抽提物中用 酒精沉淀得到一种热不稳定物质,可使淀粉水解成 可溶性糖。 1926年 Sumner首次从刀豆中得到脲酶结晶，并证 明其化学本质是蛋白质。 1982年 Thomas R Cech从四膜虫发现rRNA的自身 催化作用，并提出了核酶（ribozyme）的概念。 限制性内切酶的发现 1970年 Restriction enzyme的发现→基因工程。 1．反应条件温和，容易失活 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活（不稳定性）。 3、专一性或选择性 酶的专一性(Specificity) 又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性 注意几个概念 辅酶（coenzyme） 辅基（prosthetic group） 单体酶（monomeric enzyme） 寡聚酶（oligomeric enzyme） 多酶复合体（multienzyme complex） 三、酶的命名及分类 （三）系统分类法及编号 1．分类: 根据催化反应的性质分6大类酶 1.氧化还原酶类 oxidoreductase 2.转移酶类 transferase 3.水解酶类 hydrolase 4.裂合酶类 lyase 5.异构酶类 isomerase 6.连接酶类 ligase/synthetase 转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。 水解酶催化底物的加水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应： 从底物移去一个基团并形成双键的反应或其逆反应。 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 酶反应的速度不停在变 酶活力单位（ U ） ：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量（U/g，U/ml） 。 习惯单位（U）: 底物(或产物)变化量 / 单位时间 国际上对酶活力单位的规定 在最适的反应条件（25℃）下，每分钟内催化一微摩尔底物转化为产物所需的酶量定为一个酶活力单位，即 1IU=1μmol/min 在最适条件下，每秒钟内使一摩尔底物转化为产物所需的酶量定为1kat单位，即 　　　　　　1kat=1mol/s 1Kat=60×106 IU 八、抗体酶（abzyme) 抗体：与抗原特异结合的免疫球蛋白。 既是抗体又具有催化功能的蛋白质称为“抗体酶(abzyme)”。因为它是具有催化活性的抗体；故又称为“催化性抗体(catalytic antiboy)”。 1986年 Bichard Lerner和 Peter Schultz两个小组根据过渡态理论和免疫学原理，运用单克隆抗体技术成功地制备了具有酶活性的抗体，得到了抗体酶。 　　　　　　　　　 学习目标 1、掌握酶的化学本质及催化特点。 2、了解酶的分类、组成及命名原则。 3、了解酶的专一性及机制 4、熟知酶的分离提纯的一般方法；酶活力、比活力的概念及其测定方法。 酶的分离纯化过程中一定要随时追踪酶的活性 1982年美国T. Cech等人发现四膜虫的rRNA前体能在完全没有蛋白质的情况下进行自我加工，发现某些RN