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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
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犛犖犜1350 2004
牛锥虫病补体结合试验方法
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20040601发布 20041201实施
中 华 人 民 共 和 国 发 布
国家质量监督检验检疫总局
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犛犖犜1350 2004
牛锥虫病补体结合试验方法
1 范围
本标准规定了牛锥虫病补体结合试验方法。
本标准适用于牛锥虫病的抗体检测。
2 试验材料
2.1 器材
孔“ ”型微量板、 可调移液器、培养箱、水浴锅、 尖底离心管、离心机、
96 U 10 L 100 L 15mL
μ ~ μ
12mm×75mm试管。
2.2 试剂
2.2.1 溶血素:从生物制药厂购买,效价不低于1∶1500。
补体:选择成年雄性豚鼠 只 只,绝食 后,从心脏采血,分离新鲜血清保存于普通
2.2.2 3 4 6h 8h
~ ~
冰箱中备用。也可以购买冻干补体。
2.2.3 锥虫病抗原、阳性血清和阴性血清:从生物制品厂购买。
2.2.4 绵羊红细胞悬液的制备:见第 A.1章。
2.2.5 巴比妥缓冲液(简称 VBS):见第 A.2章。
ㅤㅤㅤㅤ
2.2.6 溶血标准比色孔的制备:见第 A.3章。
2.3 血清的处理
被检血清、标准阳性血清和标准阴性血清,使用前均需 56℃灭活 30min。
3 预备试验
3.1 溶血素效价的测定
配制 : 的补体。
3.1.1 120
溶血素稀释:将溶血素用 做 , , , , , ,
3.1.2 VBS 1∶5001∶10001∶15001∶20001∶25001∶3000
, , , 稀释。
1∶35001∶40001∶45001∶5000
溶血素效价测定:取 孔“ ”型微量板,按表 中各成分的量加入各孔中。
3.1.3 96 U 1
表 1 溶血素效价测定表 单位为微升
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