SN／T 2022-2007_牛温氏附红细胞体聚合酶链式反应操作规程.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜２０２２ ２００７ 牛温氏附红细胞体聚合酶链式反应 操作规程 ㅤㅤㅤㅤ （ ） 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳 狅犾犿犲狉犪狊犲犮犺犪犻狀狉犲犪犮狋犻狅狀 犘犆犚 犳狅狉 狆 狔 犈犲狉狋犺狉狅狕狅狅狀狑犲狀狅狀犻 狆 狔 狔 ２００７１２２４发布 ２００８０７０１实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜２０２２ ２００７ 牛温氏附红细胞体聚合酶链式反应 操作规程 １ 范围 　 本标准规定了温氏附红细胞体聚合酶链式反应方法。 本标准适用于温氏附红细胞体的鉴定和检测。 ２ 概述 　 温氏附红细胞体（ ， ）是附着于牛的红细胞或游离于胞浆的一种 犈 犲狉狋犺狉狅狕狅狅狀狑犲狀狅狀犻犈．狑犲狀狅狀犻 狆 狔 狔 狔 立克次氏体，可通过吸血昆虫、螨虫、母体胎盘、血液等传播。牛感染犈．狑犲狀狅狀犻一般不表现临床症状， 狔 严重感染引起发热、消瘦和黄疸。本标准根据犈．狑犲狀狅狀犻１６ＳｒＲＮＡ的保守序列，设计了一对特异引物 狔 ／ ，通过 反应可扩增出 的片段，用于温氏附红细胞体的鉴定和检测。 ｍｗＦｍｗＲ３ ＰＣＲ ７３８ｂｐ ３ 设备和材料 　 ３．１ 仪器设备 　 ３．１．１ ＰＣＲ扩增仪。 　 ３．１．２ 电泳仪。 　 ３．１．３ 凝胶成像系统。 ㅤㅤㅤㅤ 　 ３．１．４ 微波炉。 　 可调移液器（ ， ， ， ， ）。 ３．１．５ ２ Ｌ１０ Ｌ１００ Ｌ２００ Ｌ１０００ Ｌ 　 μ μ μ μ μ ３．１．６ 离心机。 　 天平（ ）。 ３．１．７ ０．０００１ 　 ｇ ３．１．８ 水浴锅。 　 ３．２ 耗材 　 ３．２．１ ＰＣＲ反应管。 　 ３．２．２ １．５ｍＬ离心管。 　 ３．２．３ 移液器滴头。 　 ３．３ 试剂 　 ３．３．１ 三蒸水 ０．１０３ＭＰａ灭菌 １５ｍｉｎ。 　 ３．３．２ 琼脂糖。 　 ３．３．３ 溴化乙锭。 　 ３．３．４ 酶（ ／ ）。