抗AGR2单克隆抗体18A4AGR2.pdf

学 报 ２３８ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１８，４９（２）：２３８－２４６ 抗ＡＧＲ２单克隆抗体 １８Ａ４抑制细胞外ＡＧＲ２诱导的 肿瘤细胞活性 １ １＃ １＃ ２ １ １ １，３ 于天弘，ＳｉｖａＢｈａｒａｔｈＭＥＲＵＧＵ ，ＨｅｍａＮＥＧＩ，孙宋暄 ，丁云鹤 ，武正华 ，李大伟 　１ ２ ３ （上海交通大学 药学院，上海２００２４０；生物医学工程学院；细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心，上海２００２４０） 摘　要　在两种自身不表达肿瘤相关蛋白ＡＧＲ２的黑色素瘤细胞Ａ３７５和Ｂ１６Ｆ１０中加入ＡＧＲ２以增强肿瘤细胞活性，观察 以ＡＧＲ２为靶点的单克隆抗体 １８Ａ４对细胞外ＡＧＲ２诱导的肿瘤细胞活性的抑制作用。用ＭＴＴ法和克隆形成实验检测 ＡＧＲ２，１８Ａ４抗体单用和联合作用对细胞增殖能力的影响；流式细胞术检测ＡＧＲ２，１８Ａ４抗体单用和联合作用对细胞周期的影 响；划痕实验检测细胞迁移能力；鬼笔环肽染色检测细胞形态变化；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和免疫荧光染色检测细胞内ｐ５３表达量。结 果表明，单克隆抗体１８Ａ４能够抑制细胞外ＡＧＲ２诱导的肿瘤细胞增殖速度加快，Ｇ／Ｓ细胞周期转化，迁移速度加快和细胞形 １ 态的变化。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和免疫荧光染色检测发现在化疗药物阿霉素处理的细胞中，细胞外ＡＧＲ２降低细胞内ｐ５３的表达量， 而１８Ａ４能够抑制这一现象。实验结果表明１８Ａ４能够抑制细胞外ＡＧＲ２诱导的多种肿瘤细胞活性，是一种潜在的抗肿瘤 药物。 关键词　单克隆抗体；１８Ａ４；ＡＧＲ２；肿瘤微环境；ｐ５３ 中图分类号　Ｒ９６５　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１８）０２－０２３８－０９ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　于天弘，ＳｉｖａＢｈａｒａｔｈＭＥＲＵＧＵ，ＨｅｍａＮＥＧＩ，等抗ＡＧＲ２单克隆抗体１８Ａ４抑制细胞外ＡＧＲ２诱导的肿瘤细胞活性［Ｊ］．中国药科 大学学报，２０１８，４９（２）：２３８－２４６ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＹＵＴｉａｎｈｏｎｇ，ＳｉｖａＢｈａｒａｔｈＭＥＲＵＧＵ，ＨｅｍａＮＥＧＩ，ｅｔａｌＡＧＲ２ｂｌｏｃｋｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｙ１８Ａ４ｉｎｈｉｂｉｔｓｃｅｌｌｕｌａｒｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄｂｙｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＡＧＲ２［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１８，４９（２）：２３８－２４６ ＡＧＲ２ｂｌｏｃｋｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｙ１８Ａ４ｉｎｈｉｂｉｔｓｃｅｌｌｕｌａｒｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＡＧＲ２ １ １＃ １＃ ２ １ １ ＹＵＴｉａｎｈｏｎｇ牞ＳｉｖａＢｈａｒａｔｈＭＥＲＵＧＵ 牞ＨｅｍａＮＥＧＩ牞ＳＵＮＳｏｎｇｘｕａｎ牞ＤＩＮＧＹｕｎｈｅ牞ＷＵＺｈｅｎｇｈｕａ 牞ＬＩＤａ １牞３ ｗｅｉ １ ２ ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ牞ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏＴｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２４０牷ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ牞ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏＴｏｎｇＵｎｉｖｅｒ ３ ｓｉｔｙ牞Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２４０牷ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＣｅｌｌａｎｄＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＡｎｔｉｂ