酵母菌数量变化曲线.pptVIP

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培养液中酵母菌种群数量的变化 探究培养液中酵母菌数量的动态变化 1.实验原理: (1)在含糖的液体培养基(培养液)中酵母 菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内 的酵母菌种 群, 通过细胞计数可以测 定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发 生的数量变化。 (2)养分、空间、温度和有毒排泄物等是影 响种群数量持续增长的限制因素。 2.实验目的: (1)通过探究培养液中酵母菌种群数量的 变化,尝试建构种群增长的数学模型。 (2)用数学模型解释种群数量的变化。 (3)学会使用血球计数板进行计数。 实验材料 血球计数板 肉汤培养基或无菌马铃薯培养液 试管,滴管 ,显微镜。 (1)血球计数板构造: 实物图 正面图 纵切面图 计数室,2个 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。一个特制的可在显微镜下观察的玻片 大方格 中方格 小方格 计数室 平台上有九个大方格的方格网,中间大方格为计数室 计数室放大 计数室有两种规格: 一是分为16个中方格,每中方格中有25个小方格 另一种是分为25个中方格,每中方格有16个小方格。 计数室通常有两种规格 计数时用25中格的计数板,要按对角线方位,取左上、左下、右上、右下、中央5个中格(即80小格)的酵母菌数。 如果是16中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数(即100小格)。然后求出一个小方格的细胞平均数(N) 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。 c.从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多,将计数室充满即可),勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。 方 法?? a.视待测菌悬液浓度,以每小格的菌数可数为度。培养后期的样液稀释后再计数,加无菌水适当稀释,如菌液不浓,可不必稀释。 b.取洁净的血球计数板 一块,在计数区上盖上一块盖玻片。 d.静置片刻(待细胞全部沉降到计数室底部),将血球计数板置载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数.由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。 滴液处 e.一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数,若细胞位于小方格的线上,应遵循“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则,以减少误差。 f.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。每个样品计数应重复3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),取其平均值,求出每一个小格中细胞平均数(N),按公式计算出每ml菌悬液所含酵母菌细胞数量。 g.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。 三、现象观察 每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。 菌数 时间 (天) 次数 起始 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 … … … … … … … … … 平均 多次测量取平均值。减少误差,力求准确。 怎样进行酵母菌的计数? 对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数*室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算计算中的酵母菌总数,盖玻片下,培养液厚度为0.1mm,可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式: 、从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么? 3、本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。 4、需要做重复实验吗? 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差。 不需要,本实验在前后时间上形成自身对照 需要,提高实验数据的准确性。 5、怎样记录结果?记录表怎样设计? 第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天 第1组 第2组 第3组 ------ 第n组 平均值 6、如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施? 7 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数? 摇匀试管酵母菌培养液稀释几倍后,再用血球计数板计数。 只计数相邻两边及其顶角的

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