柱前衍生化 - 高效液相色谱法跟踪检测酶法制备 - D - 谷氨酰 - L - 色氨酸反应过程-.docVIP

柱前衍生化2高效液相色谱法跟踪检测酶法制备 C 2 D 2谷氨酰2L 2色氨酸反应过程 屠春燕* 吴燕娇 袁艳娟 姚忠 唐美华 韦萍 (南京工业大学生物与制药工程学院,南京210009 摘 要 C 2D 2谷氨酰2L 2色氨酸(SCV 207是一种新型广谱免疫调节类化合物。针对酶法合成SCV 207反应体 系的特点,以邻硝基苯磺酰氯为柱前衍生试剂,RP 2HPLC 为分离模式,选用L i chrosphe r C 18柱,20mmol/L 磷酸 盐溶液(p H 3.0和乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长230n m,建立了同时分析测定多种氨基酸和小肽的方 法,所有组分于15m i n 内洗脱完毕。氨基酸及二肽在0.96~260L m ol/L 范围内线性良好,相关系数大于 019991;加标回收率在97.8%~101.6%之间;相对标准偏差为1.2%~2.9%。本方法适用于SCV 207产品 的纯度分析,以及酶法转肽制备SCV 207反应过程跟踪检测,具有分析速度快,准确度高、操作简单等优点。 关键词 色氨酸,邻硝基苯磺酰氯,衍生化,反相高效液相色谱 200202219收稿;2009205213接受 *E 2m ai:l tcy7341@126.co m 1 引 言 C 2 D 2谷氨酰2L 2色氨酸(C 2D 2G l u ta myl 2L 2tryptophan ,S CV 2