科学史话稳态概念的提出和发展 (2).PPTVIP

基因工程 基因工程的步骤 提取目的基因 直接分离法（多为原核） 目的基因与运载体结合 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 目的基因的检测和表达 谢谢您! * * 绵竹中学 目的基因的检测和表达 4 提取目的基因 1 目的基因和运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 反转录法 根据已知氨基酸序列合成DNA 最早的基因工程 人工合成法（多为真核，可为原核） 鸟枪法（散弹射击法） 不管是哪种方法得到目的基因，为了大量复制，我们可以采取PCR技术在短时间内扩增目的基因。 人工合成基因的原因 目的基因 运载体 构建重组DNA 多个限制酶切点 在宿主细胞中复制并稳定保存 具有某些标记基因 要求 要求1 满足人类某一要求的基因 要能方便地在受体细胞中检测到有没有目的基因。 要求1 要求2 要能很好地将目的基因导入受体细胞内。 受体细胞是动物的细胞，运载体最好选病毒。如果不是，可以选择质粒。 粘性末端 + 往往需要同一种限制性内切酶来处理 质粒及其上的标记基因 目的基因 重组质粒 需要DNA连接酶来处理 + 因受体细胞的来源不同，这之后采取的手段也不尽相同，在确认目的基因检测和表达正常后：①直接发酵；②进行植物组织培养； ③动物细胞培养及胚胎移殖得转基因动物，从而最终获得产品；④进一步导入受体细胞 注意 受体细胞 接受重组DNA的细胞 可以是体细胞，也可以是受精卵。可在生物体外，也可在植物体内直接操作 细真菌细胞 动物细胞 植物细胞 目的基因的检测 目的基因的 目的基因的表达 成功 需要的性状或产品 受体细胞内是否有标记基因 转录和翻译 变异实质 目的 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 定向改造生物的遗传性状 （形成人类需要的基因产物） 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 *