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木若0714 怎样培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢? 情景导入 这些定向改造基因 的设想能实现吗? 经过多年的努力,科学家终于在20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术 ——基因工程 一、基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 变异类型 结果 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 基因重组 1.1 DNA重组技术的 基本工具 * 木若0714 * 结合此图讨论如何培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢? 说出其步骤及用到的工具。 三大工具 分子手术刀——限制性内切酶 分子缝合针——DNA连接酶 分子运输车——运载体 基因工程常用工具 情景导入 一、“分子手术刀”——限制酶 1 2 3 来源? 特点? 结果? 探究1 互动课堂 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例? 这类原核生物之所以长期进化而不绝灭,有何保护机制? 来源: 主要在原核生物中 限制酶的来源 资料分析: 观察表格、尝试归纳限制性内切酶的特点 限制酶的特点 识别双链DNA分子中 特定核苷酸序列 切割特定序列中的 特定位点 专一性 限制酶作用的化学键 拓展 磷酸 二酯健 氢键 √ 限制酶作用的结果 结果 1.关于限制酶的说法中,正确的是( ) A.限制酶是一种酶,只识别GAATTC 碱基序列 B.EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子、只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中 C 及时反馈 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割(EcoRⅠ) 2.把两种来源不同的DNA进行重组,应该怎样处理? 及时反馈 缺口怎么办? G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 二、“分子缝合针”—DNA连接酶 DNA连接酶作用的化学键? 是什么? DNA连接酶和DNA聚合酶 有何异同点? DNA连接酶有哪些种类? 其来源和特点分别是什么? 探究2 阅读课本第5页,小组讨论归纳答案 DNA连接酶作用的化学键 汇报 缝合的是磷酸二酯键 . . . 相同点 催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键 不同点 DNA连接酶 DNA聚合酶 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个核苷酸加到已存在的 核酸片段上, 形成磷酸二酯键 DNA连接酶和DNA聚合酶的异同点 汇报 DNA聚合酶催化DNA的合成 2 1 DNA连接酶种类 汇报 E·coli连接酶 T4连接酶 只能连接 黏性末端 既可“缝合”黏性末端,又可“缝合”平末端 3.DNA连接酶催化的反应是( ) A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B.黏性末端碱基之间形成氢键 C.两个DNA片断黏性末端之间的缝隙的连接 D.A、B、C都不正确 D 及时反馈 三、“分子运输车”—载体 作用?? 特点? 分子 运输车 种类? 探究3 阅读课本第6页,迅速找到种类。 载体的种类 动植物病毒 λ噬菌体衍生物 其他 质粒是一种裸露的、结构简单、 独立于细菌拟核DNA之外的 双链环状DNA分子 汇报 化学本质? 条件 假如目的基因导入 受体细胞后不能保 存和复制将怎样? 1 如果载体对受体细胞 有害将怎样? 3 作为载体没有切割 位点将怎样? 2 目的基因是否进入受 体细胞,你如何去 检查? 4 载体的条件 讨论 小组讨论,归纳答案 1 2 3 4 能够在宿主细胞中稳定的保存, 并能够复制,以便提供大量的目的基因 具有多个限制酶切点,便于与外源基因结合 具有标记基因,便于检测和筛选 对受体细胞无害 载体的条件 汇报 携带目的基因进入受体细胞 使目的基因在受体细胞内大量复制 载体的作用 介绍 4.作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件及理由是( ) A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达 C 具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件 D. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选 A 及时反馈 小组活动:重组DNA分子的模拟操作 规则 说明 温馨 提示 1 2 2 3 剪刀—EcoRⅠ限制
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