实验四 四大类微生物菌落及个体形态观察.pptVIP

实验四 四大类微生物菌落及个体形态观察 一、实验目的： 比较四大类微生物菌落特征; 学习自制水浸片观察霉菌的个体形态. 二、实验原理 1、菌落观察 微生物菌落即微生物聚集在一起的群体结构。在自然界中，我们肉眼所见到的微生物都是以菌落状态存在，不同种类的微生物有其特定的群体结构。因此，根据群体结构（菌落特征），我们可以初步把它们“分门别类”作粗略鉴定。本实验通过对细菌、放线菌、酵母菌，霉菌等四大类微生物菌落特征的观察，学习以菌落特征来区分四大类微生物的基本方法。 2、放线菌观察 放线菌自然生长的个体形态的观察常用盖玻片插片培养法。 采用盖玻片插片培养法，能使放线菌生长在盖玻片上，然后将长菌的盖玻片用镊子取出，贴放在载玻片上，用显微镜镜检可见到放线菌自然生长的个体形态。 3、霉菌观察 霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。孢子的着生方式及繁殖菌丝的形态是霉菌重要的分类依据. 霉菌菌丝较粗大，可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。 三、实验器材： 1、活材料： 培养2天的细菌平板; 培养7-15天的5406放线菌平板； 培养7天的根霉（Rhizpus sp.）、青霉（Penicillum sp.）、曲霉（Aspergillus sp.）平板； 2、器材：酒精灯、镊子、载玻片、盖玻片、 解剖针、显微镜等。 四、实验步骤 （一）菌落特征的观察 用肉眼观察生长在琼脂平板上的各种霉菌菌落，并根据下列要求对每种霉菌的菌落特征加以描述。1.菌落的大小：局限生长或蔓延生长，菌落的直径和高度。2.菌落的颜色：正面和背面的颜色，培养基的颜色变化。3.菌落的形态：棉絮状、网状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 四大类微生物菌落比较表 （二）个体形态特征的观察——插片法 （二）个体形态特征的观察——插片法 （以放线菌为例） ① 接种：挑取菌种在培养基平板上密集划线接种或取0.2ml菌液涂布平板； ② 插片：无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45°角插入平板琼脂接种线上； ③ 培养：将平板倒置，于28℃培养3-5天； ④ 镜检：用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察（在盖玻片菌体附着部位低价0.1%吕氏碱性美蓝染色后观察效果更好）。 （三）霉菌观察方法 制水浸制片观察法：在载玻片上滴加一滴蒸馏水，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，放入载玻片上的水滴中,盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）. 标本片制好后，先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。注意观察菌丝有无隔膜，有无假根、足细胞等特殊形态的菌丝。注意其无性繁殖器官的形状和构造，孢子着生的方式和孢子的形态、大小等。 五、实验作业 （1）参考书本63页表描述细菌、放线菌和霉菌的菌落形态. （2）绘出根霉、青霉、曲霉的个体形态图，并注明各部位名称。 第四组值日生值日 * * 真菌的菌落 细菌的菌落 真菌的菌落特征可作为分类依据之一： 往往有霉味 常有酒香味 有泥腥味 往往有臭味 气味 多为无限 有限 有限 有限 生长范围 较牢 不牢 牢固，不易挑取 不牢 与基质结合程度 快 较快 慢 一般较快 生长速度 绒毛状，粉状，棉絮状，蜘蛛网状，菌丝疏松 表面湿润粘稠 初期似细菌菌落，晚期为粉状干燥 光滑或粗糙，湿润或干燥，较粘 表面状态 多样（白，灰蓝、绿黑、粉红等）正反面一般颜色不同 多为乳白色 多样（灰白、白红、粉红、蓝、紫、橙等）正反面颜色不同 多样（乳白、灰白、灰、红、荧光等）正反面颜色相同 颜色 大 比细菌大而厚 较小 一般较小 大小 多为原形 圆形 辐射状 小点状，多为圆形，个别呈根状，辐射状 菌落形状 马铃薯 马铃薯 高氏一号 牛肉膏 霉菌 酵母菌 放线菌 细菌 培养基 　接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 根霉（Rhizopus) 曲霉(Aspergillus) 青霉（Penicillium) *