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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
/ —
SNT2617 2010
冬生疫霉病菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofPhtohthorahibernalisCarne
y p
ㅤㅤㅤㅤ行业标准
2010-05-27发布 2010-12-01实施
中 华 人 民 共 和 国 发 布
国家质量监督检验检疫总局
/ —
SNT2617 2010
冬生疫霉病菌检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了植物检疫中冬生疫霉病菌 PhtohthorahibernalisCarne的检疫鉴定方法。
y p
、 、 、
本标准适用于针对冬生疫霉病菌寄主的苗木 枝条 枝叶 果实以及夹带土壤中的冬生疫霉病菌检
疫鉴定。
2 原理
、 。
根据冬生疫霉病菌在寄主上的症状 形态学特征和PCR特异性扩增片段为鉴定依据 该病菌的其
他相关资料参见附录A。
3 仪器
, 。
3.1 生物显微镜 体视显微镜
3.2 光照生物培养箱。
3.3 高压灭菌器。
ㅤㅤㅤㅤ行业标准
3.4 高速离心机。
, , 。
3.5 PCR扩增仪 电泳仪 凝胶成像仪
、
4 试剂 材料和培养基
4.1 试剂
, , , , ( ), , , ,
4.1.1 匹马霉素 利福平钠盐 苯菌灵 恶霉灵 碳酸钙 谷甾醇 色氨酸 硫氨 氯化钙
CaCO -
3 β
( · ), ( )。
CaCl H O 次氯酸钠 NaClO
2 2
, ( ), , , , ( ),
4.1.2 琼脂糖 SDS十二烷基硫酸钠 TrisHCl氯化镁 盐酸 EDTA 乙二胺四乙酸四钠盐 氢氧
-
, , , , ( ), , , , , ,
化钠 乙酸钠 氯化钠 TrisCTAB十六烷基三甲基溴化铵 TAE无水乙醇 苯酚 三氯甲烷 异丙醇
异戊醇, 核酸染料。
SYBRGreenⅠ
蛋白酶 ,
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