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- 2020-04-12 发布于湖北
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SCAD以NADH为辅酶催化苯乙酮酸转化为(R-扁桃酸的反应属于双底物酶促反应,遵循有序反应机理。反应机理是:辅酶分子A(NADH先进入酶的辅 酶结合部位,形成EA后底物苯乙酮酸B再进入底物结合部位,形成三元活性配合物EAB,完成氧化还原反应变成EPQ配合物,再按顺序释出产物P((R-扁 桃酸和还原形式的辅酶Q(NAD+。按King-Altman处理方式,在不考虑其它成分的抑制作用,得到了一个简化的酶促动力学方程。 v=Vmax[S]/Km+[S]利用Lineweaver-Burk双倒数法,研究了磁性纳米Fe3O4/CTS粒子固定化SCAD和纳米Fe3O4/KCTS粒子固定化SCAD的酶促动力学常数 Km和Vmax。 以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在酵母细胞悬浮液中,制备了固定化酵母细胞壳聚糖球。以苯乙酮酸为 底物,催化合成了(R-扁桃酸。最优固定化条件是戊二醛的质量分数w(GA为1%,酵母细胞与交联壳聚糖球的质量比(m(Y:m(CB为0.5:1,交联时间 为6h,固定化时间为18h,底物浓度为10 mmol·L-1,在此条件下反应最大转化率和产物光学纯度分别高达67.86%和98.05%e.e.。固定化酵母壳聚糖 球具有良好的重复使用性和贮存稳定性。 利用磁性纳米Fe3O4/CTS微球作载体固定化酵母细胞,酵母细胞主要以吸附的形式固定在磁性
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