TPX2沉默对人宫颈癌HeLa细胞凋亡和侵袭的影响及机制.PDFVIP

网络出版时间：2017-10-30 11:56:46 网络出版地址：/kcms/detail/31.2035.Q1156.006.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2017, 39(11): DOI: 10.11844/cj cb.2017.11.0152 慢病毒介导的TPX2沉默对人宫颈癌HeLa细胞凋亡 和侵袭的影响及机制 * 常海平 杨彩容 赵荣伟 张 龙 任 杰 ( 内蒙古医科大学附属医院妇产科, 呼和浩特010050) 摘要 该文的目的是研究慢病毒介导的Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xklp2, TPX2)沉默 对人宫颈癌HeLa细胞凋亡、侵袭的影响及机制。构建4种载有TPX2-shRNA 的重组慢病毒及其阴 性对照, 将5种重组慢病毒分别稳定感染人宫颈癌HeLa细胞, 利用实时荧光定量PCR和Western blot 筛选出TPX2沉默效果最佳的一组HeLa细胞作为干扰组进行后续实验。采用Transwell基底膜侵 袭实验测定各组细胞的侵袭能力。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。Western blot检测 TPX2-shRNA转染前后细胞凋亡及侵袭相关蛋白质Bcl-2 、Bax 、Caspase-3、MMP9、TIMP-1及 nm23-H 1水平。结果显示, 筛选出的RNA干扰慢病毒载体LV-TPX2-shRNA-1可有效抑制HeLa细胞 TPX2的表达; 与对照组相比, 干扰组的HeLa细胞凋亡率明显增加(P0.01); 穿过Transwell小室基 底膜细胞明显减少(P0.01) 。HeLa细胞感染LV-TPX2-shRNA-1能下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达 水平, 上调Caspase-3及Bax 的表达水平(P0.05); 上调侵袭相关蛋白质nm23-H 1及TIMP-1水平, 下 调MMP9水平(P0.05) 。以上结果表明, 沉默TPX2表达能增加宫颈癌细胞的凋亡, 可能与其上调 Caspase-3及Bax水平, 下调Bcl-2水平有关; 沉默TPX2表达能抑制宫颈癌细胞侵袭能力, 可能与其上 调TIMP-1及nm23-H 1水平, 下调MMP9的水平有关。 关键词 宫颈癌; TPX2-shRNA; 慢病毒; 细胞凋亡; 细胞侵袭 The Effect of Silencing TPX2 Gene Expression Mediated by Lentiviral on Apoptosis and Invasion in Human Cervical Cancer HeLa Cells and Its Mechanism Chang Haiping*, Yang Cairong, Zhao Rongwei, Zhang Long, Ren Jie (the Department of Obstetrics and Gynecology, the Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical College, Hohhot 010050, China) Abstract This article was aimed to investigate the effect of si