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Protocol
Phosbind 丙烯酰胺实验步骤
第一部分 Mn2+-Phosbind SDS
1、Phosbind SDS试剂的准备
丙烯酰胺溶液 Sol. A ：30 ％ （w/v ）丙烯酰胺溶液（30 ％T，3.3 ％C ）
丙烯酰胺29.0 g
N，N-亚甲基双丙烯酰胺1.0 g
⇒加入蒸馏水定容至100mL，过滤。
【保存条件】4 ℃，避光。
分离胶 Sol. B：1.5 mol/L Tris/HCl 缓冲溶液，pH 8.8 （4x 分离胶缓冲液）
Tris-HCl 缓冲液 Tris 碱（MW：121，在20℃下pKa = 8.2 ）18.2 g
pH 8.8 6.0 mol/L HCl （0.19 equivalents of Tris ）4.85 mL
⇒加入蒸馏水定容至100mL，过滤。
【保存条件】4 ℃，避光。
浓缩胶 Sol. C：0.50 mol/L Tris/HCl 缓冲溶液，pH 6.8 （4x 浓缩胶缓冲液）
Tris-HCl 缓冲液 Tris 碱6.06 g
pH 6.8 6.0mol/L HCl （0.96 equivalent of Tris 碱）8.0 mL
蒸馏水90 mL
⇒用6.0 mol/L HCl (0.1 mL 左右)调节pH 至6.8，加蒸馏水至100 mL。
【保存条件】4 ℃。
SDS 溶液 Sol. D：10% （w/v ）SDS 溶液
SDS 10.0 g
蒸馏水90 mL
⇒搅拌，加蒸馏水定容至100 mL。
【保存条件】4 ℃。
Phosbind 丙烯酰胺 Sol. E：5.0 mmol/L Phosbind 溶液（含 3% （v/v ）甲醇）
溶液 Phosbind 丙烯酰胺 (MW：595)10 mg （2 mg）
Tel: 021 Fax: 021
Web: ; Email: sales@.
Protocol
甲醇0.10 mL （0.02 mL）
蒸馏水3.2 mL （0.64 mL）
油状产品Phosbind 丙烯酰胺用0.1 mL 甲醇完全溶解在小塑料管中。
该溶液需用移液器加入3.2 mL 蒸馏水稀释。
注意：如果溶液中出现微量白色粉末状（杂质）不溶物，用2 mL 离心管离心（2000
x g，10 min）分离即可
【保存条件】铝箔纸包裹管子，溶液置于2 mL 离心管中，4 ℃，避光保存。
MnCl 溶液 Sol. F：10 mmol/L MnCl *溶液
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