王镜岩-生物化学I-第5章蛋白质的共价结构—第6章蛋白质结构与功能的关系.ppt

血红蛋白的别构效应 血红蛋白是一个四聚体蛋白，它与肌红蛋白相比，出现了一些新的性质。血红蛋白的氧合具有正协同同促效应，即一个O2的结合促进同一分子其它亚基与O2的结合。具有这种性质的蛋白质称为别构蛋白（其它蛋白质也有负协同效应的）。 血红蛋白的协同性氧结合 假设O2与Hb的结合是一种“全或无”的方式，其结合反应式为 则解离常数K 为 …………⑦ …………⑧ 按照前面肌红蛋白结合O2的定量分析的推导方法，Hb的氧饱和分数Y 的表达式为 血红蛋白与肌红蛋白氧合曲线的比较 血红蛋白的实际氧合曲线 推导氧合曲线 实际氧合曲线 图中的n为Hill系数 血红蛋白推导氧合曲线误差的原因 血红蛋白结合O2并不是“全或无”的，各个亚基结合O2是依次进行的，并且前面亚基结合了O2对后面亚基与O2的结合有促进作用。实际测定的n=2.8，若n=1，则无协同作用，若n 1则有正协同作用。对于血红蛋白来说，当 n=4 时正协同作用最大，即当1个O2与1个亚基结合后，另外3个亚基也同时与O2结合。实际情况是n=2.8。这样，Hb对第4个O2的亲和力约为与第1个O2亲和力的300倍。 血红蛋白运输氧的效率 在肺泡中，氧分压为100 torr，工作肌肉的毛细血管中约为20 torr，血红蛋白在肺泡中Y是0.97，在肌肉毛细血管中Y是0.25，释放的O2是两个Y值之差，即ΔY=0.72。这个差值越大，运输O2的效率就越高。肌红蛋白不能担当此项工作。 血红蛋白别构的异种效应 血红蛋白与O2的结合受其它分子的调节，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphate glycerate，BPG）等。虽然它们在蛋白质分子上的结合部位离血红素很远，但这些分子极大地影响Hb的氧合性质，这是别构效应中的异种效应。 2,3-二磷酸甘油酸 2,3-bisphosphate glycerate，BPG Bohr效应 组织中代谢作用产生H+和CO2，代谢越旺盛的组织，需要的O2越多，产生的H+和CO2也越多。CO2在体内被水合成碳酸。 CO2水合的结果，使组织中pH下降，即[H+]上升。 O2与血红蛋白的结合受pH和CO2浓度的影响。去氧血红蛋白对H+的亲和力比氧合血红蛋白大。因此，增加H+浓度将促进O2的释放。 HbO2 ＋H+ HbH+＋O2 Bohr效应 氧合血红蛋白在组织中释放的O2量除了受到组织中低O2浓度的作用外，还受组织中低pH的影响。后者叫做Bohr效应，因1904年发现此现象的丹麦生理学家C. Bohr而得名。 产生Bohr效应的原因是血红蛋白中一些pK值处于7附近的可解离基团的作用，主要是His，它们解离与否会影响到血红蛋白的构象，从而影响血红蛋白对O2的亲和力。 Mb和在不同pH下Hb的氧合曲线 CO2与Hb的结合 血红蛋白还能结合CO2 ，结合部位是亚基N末端游离的α－NH2。CO2的结合也能促进O2的释放。 BPG与Hb的结合 2,3-二磷酸甘油酸（BPG）是血红蛋白一个重要的别构效应剂（别构抑制剂）。正常人红细胞中约含有4.5mmol/L的BPG，约与血红蛋白等摩尔数。每个Hb分子（四聚体）只有一个BPG结合位点，位于由4个亚基缔合形成的中央孔穴内。高负电荷的BPG分子与每个β链的若干个残基的带正电荷基团通过静电结合于Hb分子上，BPG把两个β链交联在一起。O2的结合使中央孔穴变小，使BPG结合变得困难。在没有BPG存在时，O2的结合容易，而在有BPG存在时，O2的结合变得困难。 BPG分子结构及其与Hb两个β链的离子结合 BPG对Hb氧合曲线的影响 BPG对R态Hb的亲和力至少比对T态Hb低一个数量级，BPG对R态Hb的亲和力大小顺序为：HbO2 Hb(O2)2 Hb(O2)3 ，而对Hb(O2)4则完全不结合。 BPG浓度越大，Hb的氧合曲线就越往右偏移，说明BPG抑制O2的结合，并增加了正协同效应。BPG的存在可以增加Hb在组织中的卸氧量。正常情况下供给组织的氧量约为血液所能携带的最大氧量的40%（即ΔY = 40%）。 BPG对Hb氧合曲线的影响 辅基血红素 血红素由原卟啉Ⅸ（protoporphyrin Ⅸ）中间结合一个Fe原子构成，原卟啉Ⅸ是由4个吡咯环通过甲叉桥连接而成的扁平环状化合物。卟啉环中央结合Fe原子，Fe原子通常是八面体配位，应该有6个配位键，其中4个配位键与4个吡咯环的N原子相连，另两个配位键分布在卟啉环的上下。Fe原子可以是二价的或三价的，相应的血红素称为[亚铁]血红素（ferroheme，heme）和高铁血红素（fe