《db34 t 827-2008 尿液中莱克多巴胺的残留测定-酶联免疫吸附法》.pdf

ICS 备案号： DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 827—2008 尿液中莱克多巴胺的残留测定 ——酶联免疫吸附法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施 安徽省质量技术监督局 发布 DB34/T 827—2008 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省质量技术监督局批准。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。 本标准起草人：许世富、明文庆、汤春莲、陶小平。 本标准于2008年8月1日首次发布。 I DB34/T 827—2008 尿液中莱克多巴胺的残留测定 ——酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了尿液中莱克多巴胺检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。 本标准适用于尿液中莱克多巴胺的残留常规快速测定。 本标准检测限为0.1μg/L，线性范围：0.0075ng～0.25ng。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 试样制备 采集的尿样应保存于4 ℃左右的冰箱中。尿样如有混浊，应经离心处理。 4 原理 本方法是酶联免疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：反应在已包被有莱克多巴胺多抗的塑料微 孔中进行，将莱克多巴胺标准品或样品、酶标物加入微孔，温浴时，游离的和酶标记的莱克多巴胺竞争 结合莱克多巴胺抗体的结合位点。所有未反应的酶标物在洗涤步骤中被清除，结合了的酶可以由显色剂 显示出来，因为酶可以使无色的显色剂转变成蓝色，反应终止液的加入则可以使蓝色变成黄色，吸收值 可以在450nm处进行测定。颜色变化的程度反映样品中莱克多巴胺的含量，在一定浓度范围内吸光度的 高低与样品中莱克多巴胺的含量成反比。 5 试剂和溶液 5.1 除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合 GB/T6682 二级水的规定。 5.2 竞争酶标免疫法莱克多巴胺试剂盒，2℃～8℃冰箱中保存。 5.2.1 微孔板：包被有莱克多巴胺多抗。 5.2.2 莱克多巴胺标准溶液：0.1μg/mL。 5.2.3 酶标物冻干粉。 5.2.4 酶标物溶解液。 5.2.5 稀释液。 5.2.6 浓缩洗涤液。 5.2.7 显色剂。 5.2.8 终止液。 5.3 莱克多巴胺工作液：取莱克多巴胺标准溶液，用稀释液稀释为浓度范围 0.15μg/L～5.0μg/L。 5.4 洗涤液：用水 10 倍稀释厂商提供的浓缩洗涤液。 5.5 酶标物溶液：在冻干粉中精确加入 12mL 酶标物溶解液（配制后静置至少 4h 或者 2℃