基因结构与表达阐述的基本策略教程.pptVIP

基因结构与表达分析的基本策略 ;*;一、DNA序列分析;（一）双脱氧末端终止法 (Sanger ,1977);Frederick Sanger 1918～ ;DNA测序技术基础：;(一）双脱氧末端终止法（dideoxy chain termination） ;ATP、dATP和ddATP的结构;掺入N个核苷酸;;1. 双脱氧末端终止法原理;;;;15;;● 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;（二）DNA测序自动化原理;;20;表示一个SNP位点，该位点出现了双峰，对应的核苷酸分别为C和T,因此该位点为CT杂合型，如果该位点只有一个峰C或者T，则该位点基因型为CC或TT纯合型;DNA自动测序步骤;Dye labeled dideoxyterminators on ABI 3730 capillaries ; 与末端终止法不同，化学降解法是建立在对原有DNA的化学降解过程基础上。 ; 将待测DNA片段3′或5′端进行同位素标记，标记的DNA片段分成五个反应，分别用不同的化学试剂处理，造成碱基特异性切割，使DNA片段分别于某一种（类）碱基处断裂。电泳分离5组DNA混合物，放射自显影检测末端标记的DNA链的电泳区带位置。;;最新测序技术;;Solexa 测序：在一个反应中同时加入 4 种核苷的标签，采用边合成边测序（ SBS － sequencing by