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祝新年快乐! 祝申请成功! 受理项目2 本项目针对申请者自己培育、初步研究具有潜在应用价值的材料展开,针对育种实践,开展基因定位、基因聚合和育种价值研究,研究起点高,目的性明确,研究结果具有重要应用前景。 同时,本项目又紧密结合大豆分子遗传学和基因组学研究,围绕大豆植酸生物合成相关基因开展研究,所得结果将有望推动大豆相关分子遗传学的发展,加深对植酸生物合成的分子遗传基础的认识,因此具有重要的科学意义。 5. 年度研究计划及预期研究结果。(包括拟组织的重要学术交流活动、国际合作与交流计划等) 受理项目1 1) 2008.1-2008.12 ①GmNAC2 和GmNAC5 蛋白的转录活性研究;②GmNAC2 的亚细胞定位研究;③基因过量表达载体和RNAi 载体的构建与验证;④开展大豆遗传转化及分子验证,获得GmNAC2 和GmNAC5 单基因过量表达的转基因植株(T0 代)或单基因表达抑制的转基因植株(T0 代)。 2)2009.1-2009.12 ①GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子不同发育时期的原位杂交分析;②获得GmNAC2 和GmNAC5 单基因过量表达的转基因植株T1 代;③获得单基因表达抑制的转基因植株T1代;④通过杂交获得双基因过量表达或双基因表达抑制的转基因植株F1 代;⑤利用光学显微镜、扫描电镜等对转基因植株种子的发育过程进行分析。 受理项目1 预期研究结果: 1)阐明GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子发育过程中的生物学功能及调控网路。 2)发表研究论文3-5 篇,其中SCI 收录论文2-3 篇; 3)申报专利1-2 项; 4)培养研究生4 名。 受理项目2 研究计划 2008. 01-12 1、 通过扩大分离群体单株数目,利用新的在Satt416 区段有更多多态性标记的定位群体,找到与突变基因ZC lpa2-1 连锁更加紧密的微卫星标记,提高定位精度。 2、完成突变基因TW lpa1-2 的初步定位(目前已经开始构建群体),找到与突变基因紧密连锁的微卫星标记。 3、对每个突变基因各自的六组HIP 纯合型和野生纯合型材料,在不同种植环境下考察农艺和产量性状,统计分析实验结果。对收获的大豆种子,在田间条件和实验室条件下,按国家种子检验规程研究种子的发芽率、发芽势和成苗率的差异。 4、开始两个突变基因的聚合工作。 5、参加“全国低植酸作物研究联合体”举行的有关学术活动。参加第四届国际豆科作物基因组和遗传学大会(http://www.ccg.unam.mx/iclgg4/),墨西哥,2008 年12 月。 受理项目2 预期研究结果: 1、 精细定位突变基因ZC lpa2-1 和TW lpa 1-2,提出突变候选基因,为基因克隆打下基础。 2、 明确突变基因对籽粒和产量性状可能带来的影响,完成突变基因在育种应用价值中的评价。 3、 聚合两个不同的突变基因,提出分子辅助育种策略。发掘植酸含量不同程度的下降对农艺和籽粒性状带来的影响。 4、发表论文4-6 篇,其中SCI 2-3 篇。 5、以本项目为资助,完成博士研究论文一篇。 (二)研究基础与工作条件 1、工作基础(与本项目相关的研究工作积累和已取得的研究工作成绩) (1)具体、明确,图表结合 (2)处理好已完成和申请内容的关系 已构建了群体? 受理项目1 工作基础 基因克隆与表达:本实验室已从大豆中克隆了6 个NAC 基因(GmNAC1-GmNAC6)(Meng et al., 2007,in press)。本研究选择其中的两个与种子发育相关的NAC 基因GmNAC2 和GmNAC5 进一步分析表明GmNAC 基因的表达可能与种子发育状态有关。为明确大豆NAC 蛋白是否定位于核中,我们构建了GmNAC5 与GFP 基因融合的载体用农杆菌介导的方法进行洋葱表皮细胞的瞬时表达分析,结果发现GmNAC5 是定位在细胞核(如下图3)。 转基因大豆技术体系:转基因大豆的培育是本项目实施的重要环节,已经建立了较稳定大豆遗传转化体系,经Southern杂交验证,可以获得1%左右的转化效率(Yi Yu, 2006)。 基因芯片分析技术:我们利用大豆寡聚核苷酸芯片(Affymetrix)研究了大豆不同组织的转录组,已经鉴定了221个大豆花特异表达基因,并通过Real-time PCR技术进行了芯片结果的验证(黄方等,未发表资料); 蛋白质组学技术:我们已经通过蛋白质组技术研究了大豆种子发育过程中差异表达蛋白质的变化规律(郑蕊, 2005),累积了较好的蛋白组分析技术。 上述研究工作基础为本项目的顺利实施提供了材料和技术保证。 受理项目2 1、采用我国不同的大豆种质资源,通过物理诱变的方法,筛选到了2 份植酸突变种质;经过5-6个

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