现代环境仪器分析实验讲义.docVIP

现代环境仪器分析实验 讲义 武汉大学资源与环境科学学院环境科学系编 2007年4月 目录 实验一武汉市主要地表水体中PPCPs的检测 实验二极谱法测定水中重金属离子Cd2+、Zn2+和抗坏血酸(VC及电极反应速率常数 实验三火焰原子吸收分光光度法测定水中Cu2+含量 实验四紫外光谱实验-吸收光谱的测定及溶剂效应 实验五红外吸收光谱实验:透射谱与反射谱的测定 实验六工作场所空气中铍及其化合物的荧光法测定 实验一武汉市主要地表水体中PPCPs的检测 一、实验目的 本实验针对我国实际应用的药物情况,就PPCPs 中几种主要的类别(如抗生素和环境激素在武汉部分水体中的浓度情况进行检测。检测的主要对象是我国应用较广泛的几种典型的抗生素和雌激素。通过上述实验内容达到以下教学目的: 1.掌握水样中痕量有机污染物测试的基本流程; 2.学习使用固相萃取和K-D浓缩器; 3.学习GC与LC的基本结构与使用方法; 4.了解GC/MS和LC/MS分析数据的处理方法。 二、实验原理 痕量有机污染物通过固体吸附剂富集,然后被小体积有机溶剂洗脱,体积变化后,使得有机物浓度得到较大提高,然后对洗脱液通过K-D浓缩器减小体积从而进一步提高待测样品中有机污染物的浓度,以满足分析仪器的检测限要求。色谱分离以及质谱检测的原理参考其他教科书。 三、实验材料与仪器设备 1.实验材料 SPE吸附小柱(HLB和C18、普通滤纸、0.45μm滤膜、H 2SO4、甲醇、乙腈、正己烷、二氯甲烷、三氟乙酸酐(TFA、吡啶、MSTFA(N-甲基-N-三甲基硅基- 三氟乙酰胺、超纯水、N2气。 2.仪器设备 固相萃取装置(IST公司、K-D浓缩器、GC/MS (Thermo Finnigan Trace DSQ;LC/MS(Agilent 1100 LC/MSD SL 四、实验步骤 (一对于抗生素类(大致7种 1.采样 初步定下采样点的大致位置:东湖、二桥、府河、龙王庙、杨泗、月湖、宗 关、南太子湖、墨水湖、龙阳湖、南湖;在排污口的上下游还可以采样做对比。每个采样点取自水面下深约1米处,各取20升水样。 2.水样处理 将所取水样用H2SO4调节水样PH至3,将上清液通过0.45μm滤膜真空抽滤。利用以苯乙烯-二乙烯苯共聚物为主体的HLB(亲水亲酯固相萃取柱固相萃取柱。HLB固相萃取柱预先采用3×2ml甲醇、3×2ml超纯水分别进行淋洗处理,将水样倾入并控制流速约为10ml∕min。柱富集完成后,将柱于N2保护下干燥一小时,最后用2ml甲醇淋洗3次,洗脱液收集于10ml具塞离心管中,在室温下用N2吹扫至近干。最后用乙腈-水(60︰40定容至1ml,待测。 注:HLB柱对我国7种典型的抗生素有较好的富集作用(氧氟沙星、诺氟沙星、罗红霉素、红霉素、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶和磺胺甲恶唑等。 3.LC-MS∕MS分析 色谱条件:色谱柱,ODS-P(4.6mm×250mm,DIKMA,进样量20μL,流动相为乙腈(A和0.2%甲酸溶液(B,流速0.4ml∕min;梯度淋洗程序,40%A 保持8min,然后在2min内把A线性增加到60%并保持15min,随后在5min内降低A至40%并保持5min。 质谱条件:离子源为ESI源;离子源Ⅰ(GS1和Ⅱ(GS2的气体流量分别为20ml∕min和40 ml∕min,各离子源的碰撞气和气帘气流量分别为6 ml∕min和15 ml∕min,气体均为N2;辅助加热器温度450℃;电离电压5500V;检测方式为多反应选择监测(MRM离子模式。 该法对目标物有高的选择性和较低的检出限(能达到ng/L。 (二对于雌激素类 1.采样 在武汉市几个主要污水处理厂获取水样,每个20升。 2.水样处理 采样后立即处理,不能立即处理的样品放于20℃冰箱冷藏保存,并在24h 内进行处理。先用普通滤纸过滤掉较大的悬浮物等,再用0.45μm滤膜真空抽滤。用C20处理过的400mgC-18固相萃取柱过水样,流速为1~2mL/min,过柱后用3mL蒸馏水洗该小柱,后用平稳N2流吹20min,以除去小柱固定相中的水.用甲醇:正己烷:二氯甲烷=0.5:3:3的洗脱液9mL洗脱,收集淋洗液于硅烷化的瓶中.在35℃用微氮气流吹干洗脱液,密封。 3.样品的衍生化处理 在上述干燥的浓缩样品中加入200μL正己烷, 300μL三氟乙酸酐(TFA,密封后并置于90℃烘箱中加热40min.冷却至室温后,用平稳氮气流吹干溶剂,用三氯甲烷将瓶中的样品溶液转移(转移3次至塑料瓶中.用氮气将样品浓缩至0.1mL,密封待分析;或在浓缩样品中加入50μL吡啶和100μL的MSTFA(N-甲基-N-三甲基硅基-三氟乙酰胺,密闭放置50min,然后加入100μL正己烷,在100℃加热100min,冷却后进行色谱分析。