spe技术在畜禽产品残留分析应用.pptxVIP

第1页/共83页食品与农产品：残留分析要求高选择性—降低或消除基质干扰高灵敏度—痕量物质可靠的结果：定量准确度和化合物确认—重现性，稳定性和动态范围—样品基质中低浓度目标物质的准确定量—按照法规要求进行确认方法稳定性—复杂样品基质，减少样品净化操作第2页/共83页残留分析:样品前处理的重要性 是影响实验成败的决定性步骤 —占样品分析时间的比例最大(70-80%) –样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间 —占分析消耗总成本的比重最大 –消耗大量的溶剂及其它化学品 —对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节 —影响实验结果好坏的最重要因素(回收率,%RSD）第3页/共83页样品前处理的通用方法 高速离心取上清液 过滤、超滤 选择性沉淀 衍生反应 液-液萃取 固相提取(Solid Phase Extract, SPE)第4页/共83页为什么要用SPE? 样品浓缩 –提高灵敏度 样品净化 –提高灵敏度 –延长系统不间断开机时间 –延长色谱柱寿命 比液－液萃取更快,节省溶剂 可自动化批量处理 重现性好 第5页/共83页不断革新的SPE技术 1977 –率先推出业界第一个硅胶基质固相提取技术的商品化产品：Sep-Pak 1996 –推出第一个水－浸润性聚合物基质SPE吸附剂(Oasis?HLB) –快速通用性反相SPE方法学 1997 –用于Oasis?HLB的先进的新型方法学，可以获得更干净的本底(2D 优化方法学) 1999 –推出混合机理吸附剂(Oasis?MCX 和MAX)，从而可以对碱性和酸性化合物进行高选择性和高灵敏度的提取 –Oasis?96 孔提取板设计获得RD 100 大奖第6页/共83页不断革新的SPE技术2002 –Waters 最新革新SPE技术 首次使得洗脱体积低至25 μL 无需挥发与重现配制，洗脱后直接进样即可 是小体积样品的理想提取工具 灵敏度可以提高25x 2004 –推出用于保留强碱(如季铵盐)和强酸(如磺酸盐)的WCX和 WAX 吸附剂第7页/共83页SPE小柱的种类 根据吸附剂的划分 –正相 Silica /Alumina(A, B , N) / Florisil/ NH2/ CN–反相 C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–离子交换 SCX、MCX、PCX、WCX、MAX第8页/共83页传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足 –药物（农药）及代谢产物难以同时提取对碱性化合物回收不足—强硅羟基相互作用 –碱性样品回收率低小柱跑干—不吸附 –操作过程需仔细控制回收率低，重现性差是其主问题。第9页/共83页理想的样品处理方法除去干扰物 在很宽的极性范围内，对酸性、碱性及中性化合物均有可重现的高回收率 很容易实现自动化，对大量样品进行高通量处理 容易使用并且耐受性好 快速并且最终的成本低第10页/共83页PEP (Polymer enhanced polymer) ：极性提高了的共聚物具有反相SPE的最佳性质pH：0-14，810m2/g亲水性单体：亲水” —使填料具有水可浸润性质 —允许溶剂跑干而不会损失回收率和重现性“亲脂”—提供对分析物的反相保留能力第11页/共83页C18与PEP小柱相比： —溶剂跑干对回收率的影响(普鲁卡因胺、 醋氨酚、 雷尼替 丁、 心得安、 多虑平)第12页/共83页C18与PEP小柱相比： —溶剂跑干对回收率的影响第13页/共83页PEP可取代C18 的优势–吸附容量更大 是C18的3到10倍，常用规格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更简便 小柱干涸不影响回收率–方法更通用 适合性质各异的各种物质的提取第14页/共83页PEP可取代C18 的优势–开发方法更容易 聚合物基质，无硅醇基影响–对极性物质的提取回收率更高 药物(农药)及代谢产物同时提高第15页/共83页样品前处理： 适于HPLC分析的通用SPE方法—此通用方法适于多种样品基质的绝大多数被测物。 —当分析碱性化合物时，不要使用高有机含量的水溶液进行清洗，因为PEP吸附剂中不含硅醇基。 —首先使用通用方法提取。若需进一步降低干扰，可使用优化方法第16页/共83页样品前处理： 适于HPLC分析的通用SPE方法第17页/共83页pH 与化合物反相保留第18页/共83页血清中的四环素第19页/共83页血清中四环素的提取结果比较 SPE化合物%回收率%RSDPEP二甲胺四环素94.8 1.4 四环素104 0.55C18 二甲胺四环素52.8 2.82 四环素68.4 2.44 6次实验结果：加标水平：2.5μg/mL 第20页/共83页四环素类残留分析 （日本政府食品安全公告）2