CdSe量子点作探针共振瑞利散射法测定亚甲蓝.docVIP

CdSe量子点作探针共振瑞利散射法测定亚甲蓝1 彭娟娟，王雷，刘正文，何佑秋 西南大学化学化工学院，重庆（400715） E-mail: 摘 要：以巯基乙酸为稳定剂在水相中合成CdSe量子点，巯基乙酸自组装在量子点的表面形成带有负电的聚集体。在pH为4.0~7.0的中性或弱酸性介质中，可与带正电的亚甲蓝 (Methylene Blue MB)靠静电引力及疏水作用力结合形成粒径较大的聚集体，这种聚集体的形成导致共振瑞利散射(Resonance Rayleigh Scattering RRS)强度显著增大，最大散射峰位于342 nm。同时二级散射（second-order scattering SOS）和倍频散射（frequency-doubling scattering FDS）的强度也显著增强，最大散射峰分别位于575 nm、393 nm。其中，RRS方法有较高的灵敏度和较低的检出限，它的线性范围为0.034 ~2.8μg·mL-1，检出限为10.3 ng·mL-1。以此建立一种用CdSe量子点作为探针RRS法测定亚甲蓝的高灵敏，简便，快速新方法，同时讨论了最佳反应条件和影响因素，该方法具有较好的选择性，可用于尿样和血样中亚甲蓝的测定。 关键词：检测；CdSe量子点；共振瑞利散射；亚甲蓝 0. 引言 量子点(quantum dots，QDs)是一种半导体纳米晶体，它具有优良的光谱特征和光化学稳定性。量子点作为荧光标记物与生物荧光染料相比具有宽的激发谱线范围、窄的发射谱线、发光效率高、发光颜色可调，并且光稳定性好等一系列优点[1-4]。因此，常常被用于荧光探针，例如核酸的识别[5-6]，蛋白质免疫分析[7-8]，细胞成像[9-11]等。共振瑞利散射（Resonance Rayleigh Scattering）是近年来发展起来的一项新技术，由于其高的灵敏度和简易性而得到较 蛋白质 [13,14]、等生物大分子、药物 [15]、以及金属和非金属离子 [16-17]多的关注，已在核酸 [12]、 等的测定中得到越来越多的应用。然而量子点这方面的应用却很少，用量子点作探针共振瑞利散射法来检测一些药物可以扩大量子点的应用范围，同时为药物检测提供新方法。 亚甲蓝(MB)是一种吩噻嗪类染料、一种安全有效的活体染料[18]，也是一种杀菌解毒药、镇痛药。但残留的亚甲蓝有致突变的可能[19]，故痕量亚甲蓝的测量显得更加紧必要。但目前亚甲蓝的痕量分析较少[20-22]，因此需要建立一种简便的、快速的高灵敏测定亚甲蓝的方法。 本文用巯基乙酸作稳定剂水相中合成CdSe-QDs，巯基乙酸自组装在量子点的表面形成带有负电的聚集体。此时一价阳离子亚甲蓝能靠静电引力和疏水作用力与CdSe-QDs结合，形成体积较大的聚集体，从而导致RRS强度的急剧增强，同时SOS、FDS的强度也显著增强。其中，RRS方法具有较高的灵敏度和较低的检出限，可用于痕量亚甲蓝的测定。本文还研究了CdSe-QD和亚甲蓝体系RRS，SOS和FDS的光谱特征和适宜的反应条件,建立了一种用CdSe-QDs作为探针RRS法测定亚甲蓝的高灵敏，简便，快速新方法。 1本课题得到发光与实时分析重庆市重点实验室（西南大学）的资助（CSTC,2006CA8006）。 - 1 - 1. 实验部分 1.1 试剂与仪器 氯化镉(CdC12·2.5H2O，上海试剂厂)，单质硒(Se，上海美兴化工有限公司)，硼氢化钠(NaBH4，天津市环威精细化工有限公司)，巯基乙酸(TGA，天津市光复精细化工研究所)，无水乙醇(CH3CH2OH，重庆川东化工有限公司化学试剂厂)，氢氧化钠，N2，pH=5.0的BR缓冲溶液。 mol·L-1 NaOH溶BR缓冲溶液：用0.040 mol·L-1 H3PO4、H3BO3 和 CH3COOH 与 0.20 液按一定比例混合， 配成不同 pH值的缓冲溶液，并用酸度计校正其pH值。 实验用水均为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 所有测试均在室温条件下完成。 1.2 仪器 =Hitachi F-2500型荧光分光光度计(日本岛津)，参数：RRS法狭缝宽度5 nm；FDS和SOS法狭缝宽度10 nm；pHS-3C型精密酸度计（中国上海精密科学仪器有限公司）。 1.3 实验方法 [23] NaBH4+Se+3C2H5OH=NaHSe+B(OC2H5)3+3H2(g) (1) NaHSe+H2SO4=H2Se(g) +NaHSO4 (2) H2Se + CdCl2 +NaOH 2NaCl + CdSe + 2H2O (3) 1.3.1 NaHSe的制备 在20 mL三颈小烧瓶中，以N2作为保护气，磁力搅拌下，将Se粉溶于15 mL乙醇中，并在其中加入一定量的NaBH4，一段时间后，黑色Se粉消失，