鱼腥草指纹图谱研究及其中黄酮类成分分离制备.docVIP

回流提取三次,合并提取液碱压浓缩得膏状物,将膏状物以1g:2mL的比例悬浮于水,依次用石油醚、乙酸乙酯萃取.减压浓缩乙酸乙酯部分,得浸膏,备用。流程见图2.】。T ’石油醚层1l坐星l - 23 2硅腔柱层析2321样品的预处理 图2-1浸膏分馏沆程图 将2.31中得到的乙酸乙酯层浸膏用适量甲醇溶解,加入2倍量层析用硅胶拌匀.挥干溶剂.研磨粉碎。 2322装柱 装柱的具体步骤为:按样品与硅胶质量比1:20.计算出硅胶的质量,加入洗脱剂搅拌成匀浆,打开柱下面的活塞,将匀浆沿壁倒入层析柱,让柱中的溶剂军罕 昱F 兰篙卤 向下移动,沉降硅胶,待硅胶层上的溶剂高度降低至3-4cm时关闭活塞。液面上塞一层棉花,目的是防止大量加入洗脱剂时把硅胶屡冲的不平整。 2323柱层析分离 将2321中的样品加到硅胶层析柱顶端,用氯仿/甲醇(v:V=I55:45作洗脱剂,每500mL接一瓶,用TLC点板,合并含相同组分的馏分。旋转蒸发除去溶剂,得浸膏,用甲醇溶解,供分析型HPLC检测和半制各HPLC分离。 233分析HPLC色谱条件 采用分析型HPLC法对合并后的样品试样进行分析.以便跟踪目标物质的位置以及对后续分离纯化所得的样品进行纯度检测,具体色谱条件如下:色谱柱:Acclaim R120CI s(250mmx46mml d,5gin;流动相A:0.05%磷酸溶液,流动相B:乙腈;梯度条件为0—1