肾功能检验实验.pptVIP

肾功能检验 检验项目 尿素氮测定 肌酐测定 尿酸测定 血清尿素氮（BUN）测定 原 理： 二乙酰在强酸性条件下与尿素缩合成红色的4，5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色的深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定，故由试剂二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。 注：二乙酰不稳定，常由反应1中的二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。 试剂与器材 1. 酸性试剂： H2O 100ml 浓H2SO4 44ml 浓H3PO4 66ml 加水至1000ml 硫氨脲 50ml 硫酸镉 2g 置棕色瓶于冰箱保存，可稳定半年。 作用：提供生成二乙酰的酸性环境其中硫氨脲、硫酸镉可促进呈色且颜色稳定。 2. 二乙酰一肟（20%） 3. 尿素氮标准贮存液（100mmlo/l）：精确称取尿素0.6g，溶解于书并稀释定量至100ml，加少许叠氮钠防腐，于冰箱内保存。（该标准是以尿素中的氮为标准，1mol尿素含2mol氮） 4. 尿素氮标准应用液：将贮存液稀释20倍即为5.0mmol/lBUN标准应用液。 实验用品： 水浴箱（100℃）、721型分光光度计、BUN标（17.85mmol/l）二乙酰一肟、酸 操作步骤： 加入物(ml) U S B 血清 0.01 — — 标准液 — 0.01 — 酶工作液 2 2 2 混匀，置100℃水浴10分钟。用冷水冲凉待测.以B管校“0”， 510 nm波长比色， 取 A值。 计算： 血清BUN（mmol/l）=AU/AS×7.14 结果报告：略 临床意义： 正常参考值：3.57~14.28mmol/l BUN升高：1.生成过量，如高蛋白膳食，蛋白质分解加强、发热、甲亢等。2.排泄障碍，主要是肾功能衰弱，肾前性如肾血液供应不足等；肾性如肾炎等；肾后性如尿道梗阻等。 BUN下降：大量输液、严重肝脏疾患等。 注意事项 1.若用血浆标本，显色反应常产生浑浊，故以血清标本为佳。 2.本法的线性范围小于14.28mmol/l，若高于此值的样品，必须用生理盐水稀释处理再测定。 3.本法也适用于尿液或其他体液标本中BUN测定，若用尿标本时，需将尿液用生理盐水稀释50~200倍。 4.需用较长的玻璃试管,防止煮沸的水滴入试管中. 血清肌肝（Cr）测定 苦味酸显色法 原 理： 肌肝与碱性苦味酸盐作用，生成苦味酸肌肝复合物，在一定程度上，成色与物质浓度成正比关系，与同样处理的标准比较，可求出血中的肌肝浓度。 操作步骤: 1、制备工作试剂： 将R1和R2各取相同的量混合均匀即为工作试剂. 2、按下表操作： 加入物(ml) U S B 血清 0.2 — — 标准液 — 0.2 — 酶工作液 1.5 1.5 1.5 混匀，置37 ℃水浴9min，比色（λ=510nm）读取各管A值。 计 算： 血清肌肝（μmol/l）=AU/AS×200 结果报告：略 正常参考值： 男： 44~133μmol/l 女： 70~106μmol/l 临床意义： 肌肝增高的临床意义与尿素氮相同，是反应肾功能损害程度的指标，若肌肝大于442μmol/l时，表示肾功能衰竭预后不良，但有些肾炎晚期病人，由于消瘦，全身肌肉体积减少，肌肝仅轻度增高。 注意事项： 1.苦味酸具有爆炸性，应妥善保存。 2.比色在10~15min内完成较好。 3.如测定管颜色太深，应减少滤液用量，或配制几种较高浓度的肌肝标准液与之同时处理，用颜色与测定管较近的标准管进行比色计算。 4.本试验的呈色特异性不高，血中葡萄糖、酮体、丙酮酸、维生素C、蛋白质均可干扰该试验，故这类物质又称假肌肝。 尿酸测定尿酸酶法 原理: 尿酸 ＋ O2 ＋ H2O 尿囊素 ＋ H2O2 H2O2 ＋ 4-AAP ＋