动物细胞基因工程技术.pptxVIP

具有复杂的翻译后加工系统 糖基化以及二硫键在合成和分泌过 程中自然而然的正确形成 产生正确折叠和完全生物活性的蛋 白质 瞬时表达 稳定表达;瞬时基因表达系统是一个简单、有效的外源蛋白表达手段，其表达水平最高可以达到稳定细胞表达水平。蛋白质是由未整合的、不复制的质粒DNA产生的，这样使得蛋白质表达的时间相对短，只有48h到7天。 ;稳定表达系统需要得到稳定转化的细胞株，需要1～2个月的时间，在稳定转化的细胞中，DNA被整合到染色体中，这使得重组蛋白质产物可以一代接一代地产生。;哺乳动物细胞表达系统与特征 表达的蛋白质能正确加工、修饰并折叠； 糖基化等修饰能保证糖蛋白行使功能； 表达产物分泌到培养液，容易分离纯化。 细胞生长缓慢，生产效率较低； 连续细胞系导致了副产物的增加； 对培养条件要求苛刻和敏感； 可能有潜在的致病因子、免疫原性存在； 表达载体的改进和宿主细胞的改造较为复杂。;昆虫细胞表达系统与特征 安全：杆状病毒无致病性，安全性受FDA认可。 易饲养：饲养，发育快。 高量表达：用强启动子，外源基因可超量表达。 高效表达：可容纳较大的外源基因（12kb） 翻译后的加工使大部分产物显示出良好的活性。 重组率低，筛选困难，周期长。 外源基因的表达在转染的晚期，这对表达不利。 糖基化等加工途径与哺乳动物细胞不完全相同;构建