高中生物第1讲基因工程一轮复习选修3.1.pptVIP

(2)基因治疗的过程: (3)基因治疗的现状:技术还不成熟,许多试验尚未成功,许多理论和技术问题有待解决。 类型一　基因工程的基本工具 1.(2017·杭州模拟)下表中列出了几种限制性核酸内 切酶的识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示 相关限制性核酸内切酶的酶切位点。请回答下列问题: (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用____________________两种限制性核酸内切酶切割,酶切后的载体和目的基因片段通过____________酶作用后获得重组质粒。? (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________________________。? (3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为________________ ______________________,对于该部位,这两种酶 ____________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。? (4)若用Sau3AⅠ酶切图1质粒最多可能获得_________ ______________种大小不同的DNA片段。? (5)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自__________________。? 【解析】(1)由图可知,为了构建重组质粒不能用 BamHⅠ切割质粒,因为质粒被此酶切割后,两个抗性 基因都会被破坏。因此,可以使用BclⅠ和HindⅢ两种 酶切割质粒和目的基因,然后再用DNA连接酶将切割后 的质粒和目的基因连接成重组质粒。(2)由于形成的 重组质粒中氨苄青霉素抗性基因已经被破坏,因此要 筛选含有重组质粒的大肠杆菌可以在筛选平板培养基 中添加四环素。(3)由表可知,限制酶BamHⅠ和BclⅠ 切割产生的粘性末端相同,所以切割的序列可以进行 拼接,但粘性末端两侧的碱基序列不同,可能是 ,也可能是 。因重组后的碱 基序列发生变化,两种酶都不能将其切开。(4)根据 BamHⅠ、BclⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点,Sau3AⅠ在质粒上有三个酶切位点,完全酶切可得到记为A、B、C的三种片段,若部分位点被切开,可得到AB、AC、BC、ABC四种片段,所以用Sau3AⅠ酶切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。(5)某些噬菌体在基因工程中经改造后可作为载体,利用受体细胞中的成分来合成自身的DNA。 答案:(1)BclⅠ和HindⅢ　DNA连接 (2)四环素 (4)7　(5)受体细胞 2.新一代基因编辑工具由Cas9(一种限制性核酸内切酶)和向导RNA构成。该复合体能与DNA分子上的特定序列结合,并在合适位点切断DNA双链(如图所示)。DNA被切断后,细胞会启动DNA损伤修复机制,在此基础上如果为细胞提供一个修复模板,细胞就会按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变,从而实现基因编辑: 请回答: (1)在将编码Cas9的基因导入真核细胞的转基因操作中,若控制合成Cas9的基因序列已知,可用________方法合成目的基因,再构建________________导入真核细胞,该过程中需要使用的酶是________(A.限制性核酸内切酶　B.DNA连接酶　C.限制性核酸内切酶和DNA连接酶　D.DNA聚合酶)。上述转基因操作成功的标志是_________________。? (2)如图所示,基因编辑工具发挥作用时,向导RNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列因为__________ ________________,所以能结合在一起,然后由Cas9催化________键断裂,从而使DNA分子断裂。? (3)一般来说,在使用基因编辑工具对不同基因进行编辑时,应使用Cas9和________(填“相同”或“不同”)的向导RNA进行基因的相关编辑。? 【解析】(1)进行转基因操作,若目的基因序列已知, 可采用化学方法合成目的基因,然后与载体构建重组 DNA分子,并将其导入受体细胞:构建重组DNA分子需要 借助限制性核酸内切酶和DNA连接酶。对于基因工程 而言,成功的标志是目的基因(Cas9基因)在宿主细胞 中稳定地表达。(2)图示中,向导RNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列因为碱基互补配对能结合在一起,然后由Cas9催化磷酸二酯键断裂,最终使DNA分子断裂。(3)不同的基因序列不同,所需要的向导RNA也会存在差异,因此对不同基因进行编辑时,应使用Cas9和不同的向导RNA进行基因的相关编辑。 答案:(1)化学　含目的基因的重组DNA分子　C　控制Cas9基因的成功表达(或合成了Cas9)　 (2)碱基互补配对　磷酸二酯　(3)不同 【易错警示】限制性核酸内切酶使用注意事项 (1