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C.接种前,应先使接种环接触培养基以达到冷却的目的,然后再取菌体 D.在每份固体培养基表面都可形成单菌落 【解析】(1)配制培养基时,分装前要调节pH,培养基 通常用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理。0.1 mL稀释液 含细菌数为(20+18+12+14+16)÷5=16个,可得出每升 饮料含有的活菌数为16×10×103×10=1.6×106(个)。 (2)牛肉膏和蛋白胨能为葡萄球菌的生长和繁殖提供碳 源和氮源。(3)接种环在初次划线前在菌液中蘸取一 次,A错误;在超净台进行操作时应关闭紫外灯,B错误;接种前,应先使接种环接触培养基以达到冷却的目的,然后再取菌体,防止过高的温度使菌体死亡,C正确;划线分离不一定在每个培养基上都出现单菌落,D错误。 答案:(1)调节pH 高压蒸汽灭菌锅 1.6×106 (2)碳源和氮源 (3)C 2.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 (1)该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________。? (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落的操作失误不可能是________。? A.接种环灼烧后未冷却 B.划线未从第一区域末端开始 C.接种环没有经过灭菌 D.划线时从空白处开始 (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________________________,该实验设计是否合理?________,为什么?_______ ___________。? 【解析】(1)选择培养基只允许特定种类的微生物生 长,实验中要分离降解苯磺隆的菌株,因而所用选择培 养基必须以苯磺隆作为唯一碳源。(2)纯化菌株时,通 常使用的划线工具是接种环;接种环在平板上每一次 划线前,都要先灼烧灭菌并冷却,而且要从上一次划线 末端而非空白处开始划线,不冷却会烫死上次划线末端菌株,而空白处不存在菌株。(3)图乙中将蛋白酶溶液加入上清液中,可知蛋白酶用于水解上清液中的某蛋白质,由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆,但是需要设置不加入蛋白酶的对照实验,否则没有说服力,因而实验设计不合理。 答案:(1)只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖 (2)接种环 C (3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理 缺少空白对照 类型二 大肠杆菌的培养和分离 1.(2017·湖州模拟)请回答下列与“大肠杆菌的培养和分离”实验有关的问题: (1)该实验中,常采用____________培养基扩大培养大肠杆菌;扩大培养后再在____________培养基上划线进行分离。? (2)分离大肠杆菌的两种方法各有特点,其中_______ ___________法操作简单,而____________法操作复杂些,但是单菌落更易分开。? (3)该实验中,将菌液在培养基上划线后要盖好培养皿,最后将培养皿____________,放在恒温培养箱中培养。? (4)利用大肠杆菌做实验,使用过的器皿都必须进行____________处理。? 【解析】(1)大肠杆菌的培养和分离实验中,常采用LB 液体培养基对大肠杆菌进行扩大培养;在进行划线分 离时,则采用LB固体培养基进行划线分离。(2)分离大 肠杆菌的两种方法各有特点,其中划线分离法操作简 单,而涂布分离法操作相对复杂一些,但是单菌落更易 分开。(3)该实验中,将菌液在培养基上划线后要盖好培养皿,最后将培养皿倒置(盖在下面),放在恒温培养箱中培养。(4)利用大肠杆菌做实验,使用过的器皿都必须进行灭菌处理,防止污染。 选修1 第1讲 微生物的利用 考点一 培养基及无菌技术 1.培养基: (1)概念:由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。 (2)类型: 划分 标准 种 类 特 点 用 途 按物理 性质分 固体 培养基 加入凝固剂,如琼脂、明胶、硅胶等 常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面 划分 标准 种 类 特 点 用 途 按物理 性质分 半固体 培养基 在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态 可用于观察细菌的运动、鉴定菌种等方面 液体 培养基 不加任何凝固剂 常用于发酵工业和微生物扩大培养 划分 标准 种 类 特 点 用 途 按用 途分 选择 培养基 根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基 培养、分离特定的微生物 鉴别 培养基 加入某种试
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