实验七鸡基因组的PCR-RFLP分析讲解学习.pptVIP

实验七 鸡基因组的PCR-RFLP分析;一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电泳（检测基因型）;鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血；2%EDTA抗凝； 2、DNA提取： 裂解细胞核（红细胞+白细胞） 酚-氯仿去除蛋白质 酶解RNA 获取DNA;PCR扩增 1、引物设计（Genbank）； 2、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR） ;PCR反应程序 预变性 94℃ 3~5min 35循环： 变性 94 ℃ 30s~1min 退火 50~65 ℃ 30~60s 延伸 72 ℃ 1~2min 后延伸 72 ℃ 5~10min;PCR产物电泳检测结果; PCR产物+缓冲液+内切酶 5‘-TCATGA-3’ 3’-AGTACT-5’;A;电泳检测基因（2）; 实际操作环节 琼脂糖凝胶电泳检测基因型;二、实验原理;三、实验目的;四、实验材料、仪器和试剂;五、实验步骤;(一)制胶;（二）电泳;1. 将电泳完毕的琼脂糖凝胶置于自动成像系统的平台中间 2.开通紫外