基因工程以及酶学基础.ppt

第三章 基因工程的酶学基础 阿尔伯(1929 ～ ) Ⅱ型酶 分子量较小（105Da），只有一种多肽，通常以同源二聚体的形式存在。反应只需Mg++的存在，并且具有以下两个特点，使这类酶在基因工程研究中，得到广泛的应用。 识别位点是一个回文对称结构，并且切割位点也在这一回文对称结构上。 许多Ⅱ型酶切割DNA后，可在DNA上形成粘性末端，有利于DNA片段的重组。 一、ＤＮＡ连接酶 3. DNA聚合酶Ｉ5’ 3’的核酸外切酶活性 四、反转录酶（reverse transcriptase） 这类酶来自于反转录病毒，它可以RNA为模板，催化合成DNA。常用的有禽源（AMV）及鼠源（M-MLV）反转录酶两种。 含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒，逆转录酶催化的反应叫反转录（reve-rsetranscrip-tion）。在这个过程中，遗传信息流动的方向是从RNA到DNA，正好与转录过程相反，故称反转录。病毒逆转录酶含Zn2+，以脱氧核苷三磷酸为底物，从5’到3’合成DNA，反应需要引物。这个酶在许多方面与DNA聚合酶相似。目前已发现不少动物反转录病毒，近年来也发现了几种人类反转录病毒。艾滋病毒也是一种反转录病毒。 反转录酶所需模板可以是RNA或DNA，引物是带3`-OH的RNA或DNA。 它有5‘--3’合成D