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- 2020-01-14 发布于湖北
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实验六 细胞成分的荧光化学显示
【 目的要求 】
1、了解荧光细胞化学原理及基本方法。
2、熟悉荧光显微镜的使用方法。
【 实验原理 】
用一定波长的光(如紫外光)照射某些物质时,该物质的分子或原子可吸收一定量的光能而进入激发态,当物质从激发态恢复到它原来的基态时,可以电磁辐射的形式放出所吸收的光能。由于在此过程中有部分的能量作为热损失掉了,故物质从激发态回复到基态时所放出的光波的波长大于原来激发光波的波长(如可见光),这种由某种物质在激发的瞬间或激发后短时间内所发射出的光波,称为荧光(fluorescence)。
表6-1 常用的荧光染料和应用范围
荧光染料 激发光 荧 光 应用范围
溴化乙锭(Ethidium bromide,EB) 蓝紫 红 DNA、核
Ho 33258(Hoechst 33258) 紫外 蓝白 DNA、核
Ho 33342(Hoechst 33342) 紫外 蓝白 DNA、核
吖啶橙(Acridine orange,AO) 蓝光 绿(DNA)
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