(1)上述实验结果的归纳,正确的有_______(实验序号)。 (2)实验②和实验④在染色之前,都使用了一定浓度的盐酸处理。其中,实验②用盐酸可改变______通透性,加速染色剂进入细胞;实验④用盐酸与酒精混合,对材料进行解离。在两个实验操作中,都要注意盐酸浓度,处理材料时的温度和______。 (3)健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______阶反应,该反应变化是 __________ __。 ①③ 细胞膜 时间 三 [H]与氧结合形成水,同时释放大量的能量 * 解析:使用甲基绿和吡罗红进行染色体色时,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。DNA主要存在于细胞核,而RNA存在于细胞质中,因此应该是呈现红色的面积较大。使用龙胆紫对洋葱根尖分生区细胞进行染色时,染色体被染色,在间期细胞核被染成深色,在分裂期可看到染色体。②④不正确。 在高中生物实验中有多处用到盐酸,观察DNA和RNA的实验中盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进人细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。在根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中,盐酸和酒精混合液起解离作用。解离时间过短根尖分生区的细胞不易分散开,解离时间过长细胞太酥软不易取出。在线粒体在内膜上进行有氧呼吸的第三阶段,前两阶段产生的[H]在第三阶段与氧气结合生成水同时释放大量的能量。 * 高中生物实验的染色与颜色观察 * 染色剂的染色与显微镜的观察 显微镜观察的是透射光而不是反射光,所以对于大部分无色半透明的生物组织细胞结构来说,需用特殊的方法制片染色处理后才能用显微镜观察清楚。而且生物材料很少是单层细胞结构的,故还需要进行切片或压片、涂片等处理操作。 如果观察经过染色剂染色的生物材料,如观察洋葱根尖分生区有丝分裂实验时要用较强的光照。而不经染色的生物材料在显微镜下观察时,光线尽可能的较暗些。如观察质壁分离与复原实验时,如果光线太强,不容易观察到液泡。 * 碱性染料与染色体的观察 生物实验中所用的染料,按其来源可分为天然染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要化学成分的性质,又分成碱性染料、酸性染料和中性染料三大类,其碱性、酸性和中性是由染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有色部分为阴离子,即为“酸性”染料;若染料的有色部分为阳离子,则称为“碱性”染料;若染料的阴、阳离子均有颜色,则称为“中性”染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质。 * 在观察植物细胞有丝分裂实验中,常用龙胆紫溶液使染色体染成紫色,也使用醋酸洋红溶液使染色体着红色。二者染色时间都不可过长。 1%~ 2%龙胆紫溶液俗称紫药水,是人们所熟悉的外用药。龙胆紫溶液的配制是将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龙胆紫溶液略呈酸性, l%醋酸洋红本身也是酸性,同样具有碱性的助色基团。 配方中的醋酸是染料的溶剂,在染色时增加了细胞的通透性,利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色 。 此外,改良苯酚品红溶液也可使染色体着色。 应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂等。 * DNA和RNA的染色鉴定 甲基绿和吡罗红是混合染色剂。 甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末 。溶于水 ,显蓝绿色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇 。吡咯在盐酸作用下聚合成为吡罗红,可与 RNA结合呈现红色。 这两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以观察到DNA和RNA在细胞中的分布情况。 注意:①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进人细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。② 2种染色剂要混合使用,而且要现配现用。 * 活体染色剂健那绿和亚甲基蓝 健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料,线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态( 即有色状态)呈蓝绿色 , 而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态 。 因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。 线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。 * 亚甲基蓝是细胞的活体染色剂,0.01%亚甲基蓝对细胞无毒害,亚甲基蓝是一种有机物小分子,在水中离解成亚甲基蓝的阳离子(呈蓝色)和氯离子(无色),亚甲基蓝阳离子可通过主动运输进入到细菌体内,在酶的作用下被细菌分解成无色的小分子,使蓝色褪去。褪色程度越大,说明细菌越多,水污染越严重,因此可用于水污染程度指示剂。此外,亚甲基蓝是氧化还原指示剂,在有氧的环境中蓝色褪去 ,可用作氧气检测剂。 * 台盼蓝使死
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