hplc方法建立和优化.pptxVIP

绪论 ; 定性和定量分析 ;绪 论;色谱仪器介绍;色谱仪器介绍;HPLC方法建立的步骤;HPLC方法建立的步骤;HPLC方法建立的步骤;样品的性质，确定分离目的; 了解样品的相关情况： 所含化合物的数目； 化学结构（官能团）； 分子量； pKa值； UV光谱图； 被测组分在样品中的浓度范围； 样品的溶解度、沸点及其稳定性； 可能存在的干扰物质及样品的复杂程度等。 要分离的化合物是极性，弱极性、非极性还是离子化合物、两性化合物 ; 定量分析？检出某种物质？未知物的确定？纯化制备？光谱鉴定？ 是否分析所有组分？定性？一种条件有困难？分组分析？ 定量分析的准确度和精密度？（主成分精密度在±1～2％） 不同样品基质对分离的影响（如原料药、粗品、精品、残留、环境样品等） 分析的工作量，少数还是大量？时间和效率与分离的选择。 实验室的条件，如HPLC仪器的配置和档次；色谱柱系统；是否有恒温？是否可以做梯度？分析成本？实验室人员的操作技能如何？方法是否具有可移植？等等。 ; 可直接进样的溶液（注意是否与流动相匹配） 需稀释、pH缓冲、加内标或其它操作 固体样品－选择合适的溶剂溶解后进样 需提取分离的样品 预处理，除去干扰物尤其对仪器和柱子有损害的物质。 总之，将样品溶于合适的溶剂；或者用合适的溶液提取出来、或者分离处理对测定有干扰的物质，在处理中应注意被测组分的