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(2)切点： A A T T G C C T T A A G ※与DNA酶有什么区别？ 磷酸二酯键 ●实质： DNA酶：不特异性识别序列水解DNA ●水解产物： DNA酶： 限制酶： DNA片段 基本单位——脱氧核苷酸 能识别和切割双链DNA分子特异序列的核酸水解酶 限制酶： 重播 3.作用结果：切割DNA分子产生两种类型的末端：黏性末端和平末端 (1)黏性末端 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 (2)平末端 在识别顺序的对称轴上，对双链DNA同时切割。 4.举例：EcoRI限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开 限制酶 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以重组的DNA分子了。 思考 ※限制酶的命名●第一个字母（大写、斜体） 该酶的微生物属名●第二、三个字母（小写、斜体） 代表微生物种名●第四个字母（斜体） 代表寄主菌的株或型●用罗马数码I、II、III等区分同一株具  有不同特异性的酶 例 流感嗜血杆菌中三个酶的命名：Haemophilus influenzae d 属名 种名 株系 H in d I II III Hind I Hind II Hind III  ※限制酶的分类 根据限制酶的识别切割特性、催化条件及是否具有修饰酶活性可分为： I型 II型 III型 1.I型限制酶属于复合功能酶，兼有修饰和切割DNA两种特性。 功能 核酸内切酶甲基化酶ATP酶DNA解旋酶 2.III型酶与I型酶特性类似，也有甲基化功能，但无ATP酶和DNA解旋酶活力。在DNA链上有特异位点切割，其切割位点在识别位点以外。 3. II型酶（1）II型酶的识别 识别序列一般为4-6个碱基对，通常是反转重复顺序，具有180o的旋转对称性。（2）II型酶的切割功能 ★5’端黏性末端（cohesive end) 在识别顺序的双侧末端切割DNA双链，于对称轴的5’末端切割。 ※黏性末端 高中生物 选修3现代生物科技专题 专题1 基因工程 基础理论和技术的发展催生了基因工程 DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译 基因转移载体的发现 工具酶的发明 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明 基础理论 技术发明 1.什么叫基因？ 思考讨论 ？ 3.遗传信息是如何表达的？ 2.基因、DNA、染色体 之间是怎样的关系？ （1）原核生物的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶结合位点 ※1.基因的结构 能够转录为相应的信使RNA，进而指导蛋白质的合成，也就是说能够编码蛋白质 不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质 ①非编码区： ②编码区 非编码区 非编码区 编码区 编码区下游 编码区上游 RNA聚合酶结合位点 调控遗传信息的表达 原核细胞基因的结构 ③RNA聚合酶结合位点：RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并与DNA分子的一条链为模板合成RNA。转录完毕后，RNA链释放出来，紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚酶 结合位点 启动子 终止子 编码区上游 编码区上游 ④启动子是在非编码区内紧靠转录起点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能引导RNA聚合酶与正确的基因部位结合，使转录从起点开始，沿编码区进行。 ⑤终止子是在非编码区内紧靠转录终点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。 编码区 非编码区 非编码区