(三)人工合成基因法——PCR扩增技术 PCR (polymerase chain reaction) ——聚合酶链式反应 是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术,可获取大量的目的基因。 * PPT课件 PCR技术 原理: 前提: 过程: PCR扩增仪 DNA双链复制的基本原理 一段已知目的基因的核苷酸序列 目的基因DNA受热变性,解链; 引物与单链互补结合; 合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸。 * PPT课件 (四)化学合成法 适用范围: 已知核苷酸序列,基因的核苷酸数量较少。 过程: 根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的核苷酸序列,然后按碱基互补配对的原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,在通过化学方法,以单核苷酸为原料合成目的基因。 * PPT课件 二、基因表达载体的构建 基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 (一)目的 使目的基因在受体细胞内稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 * PPT课件 1、基因表达载体的组成: 目的基因、启动子、终止子、标记基因。 * PPT课件 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶结合位点 2、启动子:
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