化学发光免疫测定的影响因素分析——检验科日常培训材料.docVIP

化学发光免疫测定的影响因素分析 化学发光免疫 (chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。主要具有灵敏度高、特异性强、试剂稳定且有效期长、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单、自动化程度高等优点而被临床普遍接受。本文就化学发光免疫临床操作中可能出现的影响因素做如下分析。 1 标本的影响 要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的酶促化学发光测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而使后面加入的HRP底物反应值偏高，造成假阳性。 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。新鲜标本的检测结果更能准确反映机体的真实情况，应在采血后24小时内完成检测。血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，易造成假阳性结果。如24小时内不能进行检测，需将血清分离后，妥善保存于-20℃冰箱，做好原始记录，标本管上最