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编号: GB 19302—2010
一、 准备内容:
1、无菌器材准备表:
仪器名称 数量
平板培养皿 12
1ml 移液管 5
10ml 移液管 1
玻璃棒 1
试管 25
烧杯 3
锥形瓶 3
2 、培养基、试剂准备表:
名称 体积( ml)
BPW 225
LST 100
BGLB 100
氯化钠肉汤 225
B-P 琼脂平板 50
平板计数琼脂培养基 150
生理盐水 225 、100
备注:
无菌生理盐水
氯化钠 2. 5g 蒸馏水 300ml
平板计数琼脂
有现成的培养基,直接称取即可,配制 120ml
月桂基硫酸盐胰蛋白胨( LST)肉汤
胰蛋白胨或胰酪胨 2.0g
氯化钠 0.5 g
乳糖 0.5 g
磷酸氢二钾( K2HPO4 ) 0.275 g
磷酸二氢钾( KH2PO4 ) 0.275g
月桂基硫酸钠 0.01 g
蒸馏水 100 mL
将各成分加入蒸馏水中, 搅混均匀, 静置约 10 min ,煮沸溶解, 调节 pH ,高压灭菌 121 ℃,15min 。
煌绿乳糖胆盐( BGLB)肉汤
蛋白胨 1 g
乳糖 1.0 g
牛胆粉( oxgall 或 oxbile )溶液 20 mL
0.1% 煌绿水溶液 1.33 mL
蒸馏水 80mL
pH 7.2 ±0.1
A.2.2 制法
将蛋白胨、乳糖溶于约 50mL 蒸馏水中,加入牛胆粉溶液 20 mL (将2.0 g脱水牛胆粉溶于 20 mL
蒸馏水中,调节 pH 至 7.0~ 7.5 ),用蒸馏水稀释到 975 mL ,调节 pH ,再加入 0.1%煌绿水溶液 1.33
mL ,
用蒸馏水补足到 1 00mL ,用棉花过滤后,分装到有玻璃小倒管的试管中,每管 10 mL 。121 ℃高
压灭菌 15 min 。
7.5%氯化钠肉汤
蛋白胨 2.25g
牛肉膏 1.125g
氯化钠 16.875 g
蒸馏水 225mL
pH 7.4
将上述成分加热溶解,调节 pH ,分装,每瓶 225 mL , 121 ℃高压灭菌 15 min 。
Baird -Parker 琼脂平板
胰蛋白胨 0.5g
牛肉膏 0.25 g
酵母膏 0.05g
丙酮酸钠 0.5g
甘氨酸 0.6g
氯化锂
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