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免疫印迹解决方案 1 Western Blot简介 1.1 Western Blot原理 1.2 Western Blot优点 1.3 Western Blot应用 1.4 Western Blot成功要素 2 Western Blot基本流程 2.1 蛋白样品的提取 2.1.1 通过有机溶剂或水溶法制备总蛋白 2.1.2 通过层析或电洗脱法制备目的蛋白 2.1.3 裂解液的选择 2.2 蛋白样品的定量 2.3 蛋白样品的变性 2.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） 2.4.1 SDS基本原理 2.4.2 PAGE：聚丙烯酰胺凝胶 2.4.3 聚丙烯酰胺凝胶分类 2.5 转膜（Trarsmembran） 2.5.1 转膜的定义 2.5.2 转移膜的选择 2.5.3 转膜步骤（以槽式湿转为例） 2.5.4 转膜注意事项 2.5.5 转膜后检测（此步可以省略） 2.6 封闭（Blocking） 2.7 一抗、二抗孵育(Antibody incubation) 2.7.1 一抗孵育(Primary antibody incubation) 2.7.2 二抗孵育(Secondary antibody inucubation) 2.7.3 注意事项 2.8 蛋白检测（Detection of proteins）——显影 2.9 结果分析（Result Analysis） 2.9.1 对照