全柱成像毛细管等电聚焦电泳法测定4种生物制品等电.pdfVIP

·718· 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2017,37(4) 生物检定 全柱成像毛细管等电聚焦电泳法测定4 种生物制品等电点 周朝明 张高峡 ， （上海博唯生物科技有限公司，上海201321 ） 摘要　目的：采用全柱成像毛细管等电聚焦电泳法（WCID-CIEF ），测定多肽样品、胰岛素、融合蛋白疫苗 和HPV 病毒样颗粒的等电点。方法：采用50 mm ×100 μm 石英涂层毛细管。聚焦方法设置：1.5 kV 聚焦 1 min，3 kV 聚焦4 min/8 min ；检测波长：280 nm 。结果：多肽样品、激素样品胰岛素和融合蛋白疫苗的等电 点分别为10.98、5.87 和5.86；病毒样颗粒样品HPV 31L1、HPV 33L1、HPV 45L1、HPV 52L1 和HPV 58L1 的实 测等电点分别为8.17、7.86、7.77、7.91 和7.69 ，并且实测等电点与理论等电点基本一致。全柱成像毛细管等 电聚焦法测定生物制品专属性和精密度均符合验证要求。结论：该方法可用于生物制品的等电点分析。 关键词：全柱成像毛细管等电聚焦；WCID-CIEF ；等电点；多肽；激素；融合蛋白疫苗；病毒样颗粒；胰岛素； 重组人乳头瘤病毒 中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793 （2017 ）04-0718-06 doi ：10.16155/j.0254-1793.2017.04.25 Determination of isoelectric point of 4 kinds of biological products by whole column imaging detection capillary isoelectric focusing ZHOU Chao-ming ，ZHANG Gao-xia （Shanghai Bovax Biotechnology Co. ，Ltd ，Shanghai 201321 ，China ） Abstract　Objective ：To determine the isoelectric points of polypeptide ，insulin ，fusion protein vaccine and HPV virus-like particle （VLPs ）by whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing （WCID- CIEF ）．Methods ：Cartridges of 50 mm ×100 μm i．d．internally fluorocarbon-coated fused-silica capillary was used with the following settings ：pre-focusing for 1 min under 1．5 kV ，followed by focusing at 3 kV for 4 min or 8 min ；detection wavelength ：280 nm．Results ：The isoelectric points （pI ）of the polypeptide ，the hormone sample （insulin ）and the fusion protein vaccine were 10．98 ，5．87 and 5．86 ，respectively．The five virus-like particles displayed p values of 8．17 （HPV 31L1 ），7．86 （HPV 33L1 ），7．77 （HPV 45L1 ），7．91 （HPV 52L1 ）and 7．69 I （HPV 58L1 ）．The obtained p values were substantially consistent with the the