新型穿膜肽介导p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析.pdf

( ) 第 卷第 期 西 南 大 学 学报 自然科学版 年 月 ３７ ２ 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　２０１５ ２ ( ) Vol３７　No２ JournalofSouthwestUniversit NaturalScienceEdition Feb　２０１５ y : / DOI １０１３７１８ cnkixdzk２０１５０２００８ j 新型穿膜肽介导p５３融合蛋白的 表达及其免疫原性分析① 赵 博, 刘 婷, 孙 梅, 　 　 　 　 　 赖利金, 付爱玲, 徐兴然 　 　 , 西南大学 药学院 重庆 ４００７１５ : : , : 摘要 目的 原核表达新型细胞穿膜肽 介导 融合蛋白 并检测其免疫原性的强弱 方法 以质粒 RDP p５３ ． pET２８aＧ , , , ５３为模板扩增 ５３基因 并克隆至原核表达载体 ET２８aＧRDP中 构建重组表达质粒 ET２８aＧRDPＧ５３ 转化至 p p p p p , , , 大肠杆菌 诱导表达蛋白并纯化 确定该蛋白准确性 同时 将昆明小鼠分为空白对照组 Rosetta IPTG SDSＧPAGE ． ( ) 、 、 ( / , / , / ) , , 等容生理盐水 和 RDPＧ５３融合蛋白高 中 低剂量 ４m k ２m k １m k 组 经腹腔注射免疫 每隔２d p g g g g g g , , ( ) : , 给药 次 后眼球取血 用酶联免疫吸附法 测定血清中 的含量 结果 双酶切及测序结果显示 １ ３０d ELISA IG ． g ; , ５３基因已克隆入表达载体中 RDPＧ５３融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达．ELISA测定结果表明 与对照组比 p p , 、