第五章 分子发光分析.pptVIP

第五章 分子发光分析 分子发光 基态分子吸收了一定能量后，跃迁至激发态，当激发态分子以辐射跃迁形式将其能量释放返回基态时，便产生分子发光。 分类：依据激发模式不同 光致发光，场致发光，热致发光，化学发光等 光致发光：按激发态的类型分 荧光和磷光 第一节 荧光分析法 一、概述 分子荧光分析法是依据分子荧光光谱进行定性，以荧光强度进行定量的一种分析方法。 特点：（1）灵敏度高 检出限：比分光光度法低2～4个数量级； （2）选择性强 既可依据特征发射光谱，又可根据特征激发光谱； （3）试样量少 缺点：应用范围较分光光度法小。 二、基本原理 (一)分子荧光光谱的产生 1.分子能级与电子能级的多重性 2.荧光的产生 (二)荧光效率及其影响因素 1、荧光效率：又称荧光量子产率，就是指激发态分子发射荧光的光子数与基态分子吸收激发光的光子数之比，常用?f表示， ?f为0~1，即 3、环境因素对荧光的影响 (6)溶液荧光的猝灭 (四)荧光的激发光谱和发射光谱 3.激发光谱与发射光谱的关系 三、荧光分析仪器 1 定量依据 2 定量分析方法 五、 荧光分析法的应用 第二节 磷光分析法 磷光是从亚稳的三重态跃迁至基态时所产生的辐射 分子磷光分析法是依据分子磷光光谱进行定性，以磷光强度进行定量的一种分析方法。 一、基本原理1.磷光强度与磷光物质浓度的关系 2.温度对磷光强度的影响 随着温度的降低，磷光逐渐增强。 低温磷光:用液氮作冷却剂 3.重原子效应 使用含有重原子的溶剂或在磷光物质中引入 重原子取代基，都可以提高磷光物质的磷光强度， 这种效应称作重原子效应。 机理：重原子的高核电荷使得磷光分子的电子能级交错，容易引起或增强磷光分子的自旋轨道偶合作用，从而使S1→T1的体系间窜跃概率增大，有利于增大磷光效率。 4.室温磷光 由于低温磷光需要低温实验装置、溶剂选择 的限制，发展了以下几种室温磷光法： （1）固体表面室温磷光法 基于测量室温下吸附于固体基质(载体)上的有机化合物所发射的磷光。理想的载体是既能将分析物质牢固地束缚在表面或基质中以增加刚性，并减小三重态的碰撞猝灭等非辐射去活化过程，而本身又不产生磷光背景。 （2）胶束增稳的溶液室温磷光法 当向溶液中加入适量的表面活性剂，形成胶 束，由于胶束的多相性，改变了磷光团的微环境 和定向的约束力，从而强烈影响了磷光团的物理 性质，减小了内转化和碰撞能量损失等非辐射去 活化过程的趋势，明显增加了三重态的稳定性， 从而可以实现在溶液中测量室温磷光。 二.磷光分析仪 和荧光分析仪器基本相似。在荧光分光光度计上 配上磷光附件后，即可用于磷光定量。 （1）试样室 将试样放在盛液氮的石英杜瓦瓶内，即可用于低温 磷光测定。 （2）磷光镜 有些物质同时会发生荧光和磷光，为了能在同时有 荧光现象的体系中测定磷光，通常必须在激发光单色器 和液槽之间以及在液槽和发射光单色器之间各装一个斩 波片，并由一个同步马达带动，这种装置称作磷光镜。 三、磷光分析法的应用 特点 characteristics 二、基本原理 二、化学发光分析的仪器 本章小结 一. 荧光与磷光的产生 辐射跃迁：荧光及磷光; 非辐射跃迁：振动弛豫，系间窜越，内转换，外转换； 激发光谱与发射光谱; 荧光量子产率 荧光效率与物质分子结构的关系：跃迁类型，共轭 效应，刚性平面结构，取代基效应; 荧光效率与环境因素的关系：溶剂，温度，pH。 二. 荧光与磷光分析法 仪器结构：两个单色器，光源与检测器成直角 定量依据与方法：If=Kc, Ip=Kc 应用：定量，有机，无机 三. 化学发光分析 化学发光的产生 化学发光效率φcl=φr·φf 总发光强度与浓度的关系：A=φcl·c=Kc 化学发光装置 发光反应室－光检测器－信号放大－显示 本章作业：p65-66：1，2，5，7。 磷光分析法在无机化合物的测定中应用较少，它主要用于测定有机化合物。 (1) 稠环芳烃分析 采取固体表面室温磷光分析法快速灵敏测定稠环芳烃和杂环化合物（致癌物质） (2) 农药、生物碱、植物生长激素的分析 (3) 药物分析 见下表 一、概述 化学发光 某些物质在进行化学反应过程中，由于吸收了反应产生的化学能而被激发，从激发态返回基态时，发射出一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称