淋巴细胞的分离与淋巴细胞活性检测.ppt

实验四 淋巴细胞分离 淋巴细胞活性检测;; 外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，可根据其与其他细胞形态、体积和密度的不同进行分离。利用聚蔗糖—泛影葡胺分层液作密度梯度离心，可将不同比重的血液组分按其密度不同作相应密度梯度分布，达到分离目的，收集到淋巴细胞。 正常人和动物的T淋巴细胞表面具有能与红细胞（）表面糖肽相结合的受体（E受体），即2分子，是T细胞所特有的表面标志。在体外一定条件下T细胞能直接与结合，形成玫瑰花样细胞团，称为E玫瑰花环。常用于检测T细胞的数量、活性及分离T细胞。;【实验方法】;;5′s液洗2 次（加′s液对倍稀释,2000 离心10，对半弃上清液，重复一次）。 6.洗完后留下管底0.1液体，即为淋巴细胞悬液。 7.加入0.1 ,500 离心5 。低速离心后能迅速形成E花环，称为花环（ T ）。 8.小心吸去上清，留0.1 ，轻轻吹匀，加0.8%戊二醛2滴混匀后固定2-3 。;;