《几种常用生物活性测试方法简介》.pptVIP

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2020-01-25 发布于天津
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《几种常用生物活性测试方法简介》.ppt

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1)细胞固定:药物作用时间终点时，每孔加入50μL4℃预冷的TCA溶液(30%，w/v)固定细胞，TCA溶液的终浓度为10%。静置5 min移入4℃冰箱中固定1 h，取出用去离子水冲洗5遍，室温晾干。 2)染色:待96孔板室温下晾干后，每孔加入0.4%(w/v)的SRB染液(1%的乙酸配制)70μL，染色30 min后倒掉染液，用1%(v/v)乙酸冲洗4次，去除未结合的染料，室温晾干。 3)检测:用100μL非缓冲Tris-base碱液(10mM，pH=10.5)溶解与细胞蛋白结合的染料，水平摇床上振荡20min，采用酶标仪540nm处测定光吸收值。 Sulforhodamine B（SRB） SRB检测的一般操作步骤 MTT法操作简便、敏感 ,可重复性及信号 - 噪音比好。但 Formazan的生成受作用时间的影响 ,样品较多时测定的 OD值随时间而变 ,会增加实验误差。用Tris-base溶液溶解的SRB也可稳定较长时间。因此不同时间点固定的96孔细胞培养板可在同一时间测定，测定的吸光值结果不会受到明显影响。虽然SRB法比其他检测方法操作步骤繁琐，但是由于时间可以自己掌握，不受限制，因此适用于高通筛选。 SRB更适于测定悬浮细胞，用TCA能完全酸化固定细胞，较之MTT法吸去上清，不会带来细胞损失，测量结果更准确。 Sulforhodamine B（SRB） SRB的优点 2 总结 3 分子水平活性测试方法 1 CONTENTS 细胞水平活性测试方法总结 CCK-8 SRB ……… 细胞水平分子水平 ELISA MTT 生物活性测试方法 TR-FRET ITC SPR ……… TR-FRET SPR ITC AlphaScreen FA BRD4(BD1) 总结 dsfdbsy384y982ythb3oibt4oy39y409705923y09y53b2lkboi2y58wy0ehtoibwoify98wy049ywh4b3oiut89u983yf9ivh98y98sv98hv98ys9f698y9v698yv98x98tb98fyd98gyd98h98ds98nt98d8genklgb4klebtlkb5k tkeirh893y89ey698vhkrne lkhgi8eyokbnkdhf98hodf hxvy78fd678t9fdu90gys98y9shihixyv78dfhvifndovhf9f8yv9onvkobkw kjfegiudsfdbsy384y982ythb3oibt4oy39y409705923y09y53b2lkboi2y58wy0ehtoibwoify98wy049ywh4b3oiut89u983yf9ivh98y98sv98hv98ys9f698y9v698yv98x98tb98fyd98gyd98h98ds98nt98d8genklgb4klebtlkb5k tkeirh893y89ey698vhkrne lkhgi8eyokbnkdhf98hodf hxvy78fd678t9fdu90gys98y9shihixyv78dfhvifndovhf9f8yv9onvkobkw kjfegiu dsfdbsy384y982ythb3oibt4oy39y409705923y09y53b2lkboi2y58wy0ehtoibwoify98wy049ywh4b3oiut89u983yf9ivh98y98sv98hv98ys9f698y9v698yv98x98tb98fyd98gyd98h98ds98nt98d8gen 56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghmghm 56384866666gjfdghm